Виктория пеличич: Viktorija Pelicic photos | IMAGO

Разное

Содержание

Пять вопросов Кевину Кураньи

25 апреля 2014

Нападающий московского «Динамо» заполняет нашу анкету

Если не эта профессия, то какая?

Я бы все равно хотел заниматься спортом или чем-то, со спортом связанным. Пусть даже продавать кроссовки или вот такие кепки, как сейчас на мне. А что? Забавно было бы!

Собаки или кошки?

Мне нравятся и те и другие. Но на расстоянии, не у меня дома. Я слишком много летаю и переезжаю, чтобы кого-то заводить.

Самое интересное место на земле, где вы побывали? Или хотели бы побывать?

Я бы хотел объездить весь мир! Например, я никогда не был в Нью-Йорке. Говорят, что это удивительный город. Еще я бы с удовольствием посетил Сингапур.

Человек, который произвел на вас наибольшее впечатление?

Франц Беккенбауэр! Он очень много сделал для развития немецкого футбола. Беккенбауэр – удивительный футболист. И очень хороший человек.

Как вы заработали первые в жизни деньги?

Игрой в футбол. Помню, на эти деньги я устроил праздник и позвал на ужин всех своих друзей.

Для справки

Кевин Деннис Кураньи Родригес родился в Рио-де-Жанейро. Вырос в Панаме. Отец немецко-венгерского происхождения, мать родом из Панамы. Гражданин Бразилии, Панамы, Германии. Жена – хорватка Виктория Пеличич. В 2010 году перешел в «Динамо», генеральным спонсором которой является банк ВТБ, из «Шальке-04». Свой первый матч за сборную Германии Кураньи сыграл в отборочном турнире на чемпионат Европы-2004 против сборной Литвы 29 марта 2003 года. 11 октября 2003 года в шестом матче за национальную команду нападающий забил свой первый мяч, установив окончательный счет в матче против Исландии (3:0) и оформив выход сборной Германии на Евро-2004. Кевин играл за сборную в финальной части Евро-2004 и на Кубке Конфедераций-2005, но не попал в заявку на домашний чемпионат мира-2006. 11 октября 2008 года, после того как тренер сборной Германии Йоахим Лев не включил его в основной состав на игру со сборной России, самовольно уехал домой.

После этого Лев заявил, что больше не вызовет Кураньи в сборную.

Благодарим вас за участие в улучшении нашего контента!

биография и карьера немецкого футболиста

Автор Иван На чтение 5 мин Просмотров 1.5к. Опубликовано

Карьеру немецкого нападающего Кевина Кураньи нельзя назвать выдающейся. Но это был по-настоящему классный форвард, которому волей судьбы не удалось поиграть за топ-клубы.

Кевин Денис Кураньи Родригес

  • Страна – Германия.
  • Позиция – нападающий.
  • Родился: 2 марта 1982 года.
  • Рост: 190 см.

Биография и карьера футболиста

Кевина Кураньи можно назвать гражданином мира. Он родился в Рио-де-Жанейро, вырос в Панаме, а большую часть игровой карьеры провел к Германии. Футболом он начал заниматься в молодежных командах Бразилии и Панамы, а в 15-летнем возрасте, после переезда семьи в Германию, оказался в академии «Штутгарта».

«Штутгарт»

2001-2005

Дебют Кураньи за первую команду совпал с появлением в «Штутгарте» Феликса Магата, который стал подпускать молодого форварда к основе. В сезоне 2001-2002 он сыграл 6 матчей, забил 2 гола. Впрочем, Магат, отличавшийся своеобразным подходом к тренировкам и воспитанию игроков, не давал Кевину расслабляться.

«Ты никто, твое место во второй команде»,

говорил он футболисту.

Кураньи все понял правильно. Уже в сезоне 2002-2003 он с 15-ю голами разделил третью строчку в списке лучший снайперов бундеслиги с Клаудио Писарро, а «Штутгарт» завоевал серебряные медали.

Будучи типичным «наконечником копья», Кураньи неплохо действовал в подыгрыше, чему способствовала его южноамериканская школа, а высокий рост позволял ему успешно играть на «втором этаже».

«Шальке 04»

2005-2010

Летом 2005 года Кураньи подписывает контракт с «Шальке 04». Здесь Кевин продолжает исправно делать свою работу, забивая полтора – два десятка голов за сезон.

В чемпионате Германии 2006-2007 Кураньи с 15-ю голами становится третьим бомбардиром, а «Шальке» занимает второе место, отстав от чемпиона всего на 2 очка. По иронии судьбы, им стал бывший клуб Кураньи «Штутгарт».

При Кураньи «Шальке» лишь раз не вошел в четверку лучших, а в сезоне 2009-2010 снова боролся за титул, уступив в этот раз «Баварии». Кевин тогда отметился 20-го голами, 18 из которых были забиты в чемпионате.

«Динамо» (Москва)

2010-2015

Переход в «Динамо» наделал много шума как в российской, так и в немецкой прессе. Ещё бы, один из лучших бомбардиров бундеслиги, в недавнем прошлом форвард сборной Германии, находящийся в расцвете сил, меняет бундеслигу на чемпионат России.

Понятно, что в основе этого перехода лежали деньги – зарплата Кураньи в «Динамо» составил 6 миллионов евро в год. К чести форварда, он не стал лицемерить и честно рассказал об этом в своем открытом письме фанатам «Шальке».

В «Динамо» Кевин, как настоящий профессионал, честно отрабатывал свою зарплату. В 151 матче за «бело-голубых» Кураньи забил 56 голов. В те годы тренерский штаб динамовцев располагал весьма и весьма неплохим составом, но выше четвертого места команде подняться не удавалось.

«Хоффенхайм»

2015-2016

По окончании срока соглашения с российским клубом Кевин Кураньи перешел в «Хоффенхайм», но заиграть здесь не получилось. За сезон он вышел на поле всего 15 раз и не забил ни одного гола. После этого форвард объявил о завершении карьеры.

Сборная Германии

2003-2008

В сборной Германии Кевин Кураньи дебютировал в отборочном турнире Евро-2004, затем отыграл все матчи финальной части, которая завершилась вылетом из группы.

Юрген Клинсманн не включил Кураньи в заявку на домашний мундиаль, но с приходом Йоахима Лева Кевина снова стали вызывать в национальную команду, а места в ней он лишился в результате собственного необдуманного поступка.

В октябре 2008 года, будучи не включенным в стартовый состав на отборочный матч ЧМ-2010 против России, Кураньи покинул расположение сборной. Такого демарша Лёв ему не простил.

Всего за сборную германии Кевин Кураньи сыграл 52 матча, забил 19 голов.

Титулы Кевина Кураньи

Командные

  1. Вице-чемпион Европы.
  2. Бронзовый призёр Кубка конфедераций.

Индивидуальные

  1. Включен в список 33-х лучших футболистов чемпионата России 2010 года.

Семья и личная жизнь Кевина Кураньи

Интернациональные корни Кураньи (его отец – немец венгерского происхождения, мама – уроженка Панамы) сказались на выборе подруге жизни. Жена Кураньи Виктория Пеличич родом их Хорватии. Пара воспитывает двоих детей – сына Карло и дочь Вивьен.

Интересные факты

  • Кевин Кураньи имеет три гражданства: Бразилии, Германии и Панамы.
  • В 2014 году Кевин Кураньи, находясь в отпуске в Бразилии, спас тонувшую женщину.
  • Кураньи известен своей благотворительной деятельностью, в том числе и в России в период выступлений за «Динамо».
  • Перед Кубком леганд-2020 Кевин Кураньи тренировался с «Динамо» (Брест).

Кевин Кураньи являлся любимчиком болельщиков всех клубов, за которые ему довелось выступать. Он всегда был открыт, мог пообщаться с людьми и никогда не отказывался дать автограф. Так что это не только классный футболист, но и замечательный человек.

Мне нравится6Не нравится

краткая биография и карьера бывшего капитана московского Динамо

Кевин Кураньи родился 2-го марта 1982-го года в Бразилии (Рио-де-Жанейро). У этого игрока довольно интересная карьера и личная биография. Поэтому данную тему стоит обсудить более подробно.

Вкратце о биографии

Кевин Кураньи родился в очень обеспеченной семье. Вырос он в Панаме. У него достаточно “богатая” национальность. Отец Кевина имеет немецко-венгерское происхождение, мама же – коренная жительница Панамы. Не удивительно, что сам футболист Кевин Кураньи на сегодняшний день является гражданином не одной и даже не двух стран. Он имеет паспорт трех государств. Это, как можно догадаться, Бразилия, Панама и Германия.

Сейчас Кевин Кураньи женат на яркой блондинке по имени Виктория Пеличич. Девушка хорватской национальности, однако еще она великолепно владеет русским языком. У пары есть двое детей.

Футболом Кевин начинал увлекаться с шести лет, обучаясь искусству этого вида спорта в ФК “Серрано Петрополис”. Там он учился до 1993-го, после чего его взяли в “Лас Промесас”. Больше года в этой команде Кураньи не продержался, перейдя в “Спортинг”, а затем обратно в “Лас Промесас”. С 1996-го по 1997-й Кевин выступал за свою самую первую команду (“Серрано”), а потом перешел в “Штутгарт”, с которого и началась его настоящая, профессиональная карьера.

Карьера в Москве

Пожалуй, наиболее ярким периодом в жизни игрока является время, когда он выступал за московский “Динамо”. Сам Кевин Кураньи тоже думает так. После своего перехода в нынешнем, 2015-м, году в “Хоффенхайм” он сказал, что навсегда остался фанатом “Динамо”. За московскую команду он отыграл пять лет (с 2010-го по 2015-й), вышел на поле 123 раза и забил целых пятьдесят голов.

Вообще, перед заключением контракта с россиянами в 2010-м году Кевин Кураньи все несколько раз взвесил. И принял правильное, по его мнению, решение. Тогда многих удивила свежая информация о том, где играет Кевин Кураньи.

Но в “Динамо” футболист смотрелся хорошо – с этим не поспоришь. Уже по итогам 2010-го года его болельщики признали лучшим игроком клуба. Он вышел на поле 16 раз и забил целых 9 голов. В последующем сезоне он тоже отличился – сразу же в первом туре. Играл нападающий отлично, так что в 2012-м его назначили капитаном клуба. Правда, следующий сезон, 2013/14, он пропустил из-за полученной травмы.

Международная карьера и достижения

Кевин Кураньи, помимо выступления за различные клубы (“Штутгарт”, ”Шальке-04”, ”Динамо” и т.д.), известен и своей карьерой в сборной Германии. Дебютировал он в составе этой команды в 2004-м году – тогда это был матч, проходивший в рамках отборочного турнира на чемпионат Европы 2004-го года.

В 2003-м году, 11-го октября, он оформил свой первый гол. Таким образом Кевин закрепил победный счет в матче, проходившем против сборной Исландии. В конце игры на табло высветились цифры 3:0. Так Германия вышла на Евро-2004.

Но в заявку на домашний Чемпионат Мира футболиста не включили. Так же как и в основной состав на игру против российской сборной в 2008-м году. После этого Кевин уехал домой, а главный тренер – Йоахим Лёв — сказал, что Кураньи в команду больше вызывать не будут.

Но зато Кевин является одним из 33 лучших футболистов РФПЛ, а также серебряным и бронзовым призером Чемпионата Европы 2008 и Кубка Конфедераций 2005.

définition de %d0%9a%d0%b5%d0%b2%d0%b8%d0%bd%20%d0%9a%d1%83%d1%80%d0%b0%d0%bd%d0%b8 et synonymes de %d0%9a%d0%b5%d0%b2%d0%b8%d0%bd%20%d0%9a%d1%83%d1%80%d0%b0%d0%bd%d0%b8 (bulgare)



%d0%9a%d0%b5%d0%b2%d0%b8%d0%bd%20%d0%9a%d1%83%d1%80%d0%b0%d0%bd%d0%b8 : définition de %d0%9a%d0%b5%d0%b2%d0%b8%d0%bd%20%d0%9a%d1%83%d1%80%d0%b0%d0%bd%d0%b8 et synonymes de %d0%9a%d0%b5%d0%b2%d0%b8%d0%bd%20%d0%9a%d1%83%d1%80%d0%b0%d0%bd%d0%b8 (bulgare)

Contenu de sensagent

  • définitions
  • synonymes
  • antonymes
  • encyclopédie
  • определение
  • синоним

dictionnaire et traducteur pour sites web

Alexandria

Une fenêtre (pop-into) d’information (contenu principal de Sensagent) est invoquée un double-clic sur n’importe quel mot de votre page web. LA fenêtre fournit des explications et des traductions contextuelles, c’est-à-dire sans obliger votre visiteur à quitter votre page web !

Essayer ici, télécharger le code;

Solution commerce électronique

Augmenter le contenu de votre site

Ajouter de nouveaux contenus Add à votre site depuis Sensagent par XML.

Parcourir les produits et les annonces

Obtenir des informations en XML pour filtrer le meilleur contenu.

Indexer des images et définir des méta-données

Fixer la signification de chaque méta-donnée (multilingue).

Renseignements suite à un email de description de votre projet.

Lettris

Lettris est un jeu de lettres gravitationnelles proche de Tetris. Chaque lettre qui apparaît descend ; il faut placer les lettres de telle manière que des mots se forment (gauche, droit, haut et bas) et que de la place soit libérée.

boggle

Il s’agit en 3 minutes de trouver le plus grand nombre de mots possibles de trois lettres et plus dans une grille de 16 lettres.

Il est aussi possible de jouer avec la grille de 25 cases. Les lettres doivent être adjacentes et les mots les plus longs sont les meilleurs. Participer au concours et enregistrer votre nom dans la liste de meilleurs joueurs ! Jouer

Dictionnaire de la langue française
Principales Références

La plupart des définitions du français sont proposées par SenseGates et comportent un approfondissement avec Littré et plusieurs auteurs techniques spécialisés.
Le dictionnaire des synonymes est surtout dérivé du dictionnaire intégral (TID).
L’encyclopédie française bénéficie de la licence Wikipedia (GNU).

Traduction

Changer la langue cible pour obtenir des traductions.
Astuce: parcourir les champs sémantiques du dictionnaire analogique en plusieurs langues pour mieux apprendre avec sensagent.

 

4536 visiteurs en ligne

calculé en 0,156s

allemand anglais arabe bulgare chinois coréen croate danois espagnol espéranto estonien finnois français grec hébreu hindi hongrois islandais indonésien italien japonais letton lituanien malgache néerlandais norvégien persan polonais portugais roumain russe serbe slovaque slovène suédois tchèque thai turc vietnamien

allemand anglais arabe bulgare chinois coréen croate danois espagnol espéranto estonien finnois français grec hébreu hindi hongrois islandais indonésien italien japonais letton lituanien malgache néerlandais norvégien persan polonais portugais roumain russe serbe slovaque slovène suédois tchèque thai turc vietnamien

Виктория Пич в бегах: из России — от гомофобии и уголовного дела

Виктория Пич — популярная бьюти-блогерка, у нее 150 тысяч подписчиков в Инстаграме и два миллиона на YouTube. В начале этого года ее селфи в социальных сетях из России сменились счастливыми фотографиями с пляжа Санта-Моника в Лос-Анджелесе. Ни одному из подписчиков Вика не рассказала, что она сбежала из России из-за уголовного дела о “насильственных действиях сексуального характера в отношении несовершеннолетних”, которое на нее завели в сентябре прошлого года.

Я не понимаю, зачем иметь отношения с мужчинами, если есть женщины?

“Я чувствую такую утрату, покинув Россию, — говорит Виктория Пич. — Там все вся моя жизнь. Я даже зиму любила, слякоть и холод”. Двадцатипятилетняя Пич переехала в Москву в 2013 году из маленького уральского города и создала свой видеопродакшн по производству вирусного контента. Больше половины молодых россиян готовы готовы уехать из страны, если предоставится такая возможность, но Пич никогда не была в их числе. 

На своем основном канале в YouTube “Академия порядочных парней” Вика выкладывала в основном развлекательные видео, но еще она делала шоу для детей “Real Talk”. “Real Talk” – аналог американского YouTube-шоу “HiHo Kids”, в котором дети задают волнующие вопросы людям из разных сфер. В последних выпусках “HiHo” гостями были, например, несовершеннолетняя мама и человек с дварфизмом. Задача шоу — с помощью разговоров на деликатные темы развить у детей толерантность и уважение к другим людям. Съемки проходят под чутким контролем родителей, которые тоже присутствуют в студии.

“Американская программа нас вдохновила”, — вспоминает Пич. — Мы решили сделать похожую, только с учетом российский реалий”.

Один из выпусков Виктория решила посвятить проблемам, с которыми сталкиваются члены ЛГБТ-сообщества. В качестве гостя позвали молодого графического дизайнера Максима Панкратова. Максим в черной водолазке и джинсах сидит в салатовом пластиковом кресле, напротив него – дети. Они спрашивают о его жизни. Родители всех детей дали согласие на их участие в съемках. Для всех этих семей проблемы ЛГБТ так или иначе были близки. 

Выпуск набрал больше полутора миллионов просмотров, причем негативных комментариев практически не было – и Пич этим особенно гордится. О сексе в выпуске не было речи ни в какой форме. 

“Что мы такого сделали? Просто попросили человека рассказать о своей жизни”, – говорит Пич.

На видео двое детей, кстати, сказали, что негативно настроены по отношению к геям. “Я вообще к ним очень плохо отношусь. Мне это совсем не нравится. Я не понимаю, зачем иметь отношения с мужчинами, если есть женщины?”, — сказал в передаче десятилетний Даниил Массов.

Панкратов к этому отнесся спокойно и даже посмеялся над вопросом. В какой-то момент, пытаясь объяснить самой младшей участнице, шестилетней девочке, как это — понимать, что ты гей, Максим сказал: это как быть уверенным в том, что ты любишь шоколад. 

Другой участник передачи, десятилетний Елисей, спросил Панкратова, чем ему не нравится в России. 

“Мне не нравится Россия тем, что она не соответствует параметрами моей жизни”, — ответил дизайнер. — Я здесь не могу полностью раскрываться и чувствовать себя защищенным”.

Елисей сказал: “Надеюсь, это Путин не услышит”.  

Запрос на блокировку

Шоу бы не получило ту славу, которой его авторы вовсе не добивались, если бы его не заметила консервативная общественная организация, пропагандирующая “семейные ценности” из Санкт-Петербурга. А дальше все произошло по традиционной для России схеме: жалоба в Роскомнадзор, травля на федеральных каналах. Инициативу подхватил вице-спикер Госдумы Петр Толстой, который назвал шоу “этически недопустимым и аморальным”. Он попросил Роскомнадзор провести проверку шоу.

Вице-спикер Госдумы Петр Толстой

Роскомнадзор поначалу не нашел нарушений российского законодательства в выпусках “Real Talk”, тогда Толстой пожаловался в прокуратуру. Дальше произошло то, чего никак нельзя было ожидать.

Следственный комитет не только возбудил дело по закону о “гей-пропаганде”, который запрещает “пропаганду нетрадиционных сексуальных отношений среди несовершеннолетних”. Правоохранительные органы начали расследование еще и по 132 статье УК РФ — “насильственные действия сексуального характера в отношении детей”. Дела по этой статье чаще всего возбуждают в случаях, связанных с производством детской порнографии или педофилией. Например, по этой же статье обвиняют петрозаводского историка Юрия Дмитриева. 

“Я была в шоке, — говорит Светлана Захарова, представительница общественного движения Российская ЛГБТ-сеть. — Я даже не представляла, что такое возможно”.

После этого передумал и Роскомнадзор: ведомство отменило свое прежнее решение, добавив эпизод с Панкратовым в список запрещенных материалов, и пожаловалось на ролик в YouTube.

YouTube уведомил Пич: если она не удалит видео, то, согласно российскому законодательству, платформа будет обязана его заблокировать. Представители Google, материнской компании YouTube, не ответили на неоднократные запросы о комментариях. Но из отчета компании, видно, что российское правительство лидирует в списке стран по запросам на удаление контента. 

С 2009 года, когда Google начал собирать эту статистику, Кремль отправил компании более 80 тысяч запросов на удаление. Компания удовлетворила 75% из них. Для сравнения, США подали 8 тысяч таких заявок, а Китай — меньше тысячи.

В отчете Google перечислено общее число материалов, которые страны требовали удалить с 2009 года. Каждый такой “материал” — это контент на одной из платформ, принадлежащих Google. Например, запись в блоге на Blogger, видео на YouTube или ссылка в поисковике. Ниже приведен график распределения запросов по странам. Россия лидирует с невероятным количеством – 477 146 удаленных единиц контента.

В ответ на обвинения Пич сразу же удалила канал “Real Talk”. Она надеялась, что история закончится, и она забудет ее, как страшный сон.

“Откровения порнозвезд и педерастов”

Но это только подлило масла в огонь. После удаления канала, СМИ продолжали рассказывать в эфире про “насильственные действия” над детьми, и показывать отдельные фрагменты из шоу. Только теперь никто из зрителей не мог найти оригинал – и узнать контекст. 

“Американский видеохостинг обучает российских подростков откровениями порнозвезд и педерастов”, – гласит заголовок на одном из новостных сайтов. На государственных телеканалах началась настоящая травля Пич и ее канала.  

Виталий Милонов, известный своими радикальными консервативными взглядами, присоединился к Толстому в нападках на “Real Talk”. В дискуссиях по телевизору — в промежутках между гомофобными шутками — он сурово предупреждал о влиянии западных ценностях, развращающих российское общество. 

“Малолетнему ребенку рассказывают про нюансы и подробности сексуальных отношений”, — возмущался Милонов в одной из передач. Зрители в студии аплодировали. Когда Милонов разгорячился и начал кричать, что “ударил бы этого имбецила в челюсть”, имея в виду Панкратова, многие засмеялись. 

Многое, о чем говорили в передачах, посвященных “Real Talk”, хорошо знакомо зрителям российского телевидения, где гомосексуальность часто приравнивается к зоофилии и педофилии, а интернет называют опасным местом который надо проверять и контролировать.

“Это просто цирк, — говорит Пич. — Если бы в видео действительно был какой-то состав преступления, никто бы так не смеялся. Это очень серьезная статья, по которой обвиняют насильников детей”. 

Лишь предлог

В 2013 году, когда так называемый закон “о пропаганде нетрадиционных ценностей” вступил в силу, Пич было 19 лет. В тот год она как раз переехала в Москву. Тогда ее новостная лента состояла из музыкальных видео и постов бьюти-блогеров, а не из политики. Она никогда не голосовала на выборах и никогда не принимала участия в протестных акциях. “Если честно, я даже не знала, что такой закон приняли”, — признается Пич.

В 2017 году Европейский суд по правам человека признал этот закон дискриминирующим. Однако по словам юриста Александра Белика, который оказывает юридическую помощь Российской ЛГБТ-сети, в России он практически не применялся. В прошлом году двое человек по закону о “пропаганде нетрадиционных ценностей” отправились под суд, а с момента его принятия обвинения по нему вынесли только 20 людям.

И хотя суды этот расплывчатый закон применяют неохотно, к нему часто обращается Роскомнадзор, чтобы удалять контент без судебного разбирательства. Блокировки — более изощренный способ заставить ЛГБТ-сообщество замолчать, чем судебное преследование, особенно когда этому содействуют крупные компании, такие как Google.

Роскомнадзор представляет статистику лишь по количеству заблокированных страниц, но из нее невозможно понять, сколько конкретно групп ЛГБТ-тематики заблокировано в социальных сетях.

“С помощью блокировок они пытаются уничтожить ЛГБТ-сообщество настолько, насколько это возможно”, — считает Белик. 

Один из ста

Осенью 2019 года адвокаты уверили Пич, что обвинения в ее адрес “абсурдны” и вероятность того, что против нее возбудят уголовное дело, “один процент из ста”.

Следственный комитет на протяжении нескольких недель обзванивал родителей детей, которые были на шоу, а также допрашивал Максима Панкратова. Родители пожаловались правозащитникам, что на них оказывают давление и заставляют написать жалобу на Пич, угрожая лишением родительских прав. 

Саму Викторию допрашивали дважды. Она начала понимать, что ее дело стало слишком политическим для властей, чтобы откатить его назад. И тогда Пич купила билет в США в один конец. Незадолго до этого она получила туристическую визу.

По дороге в аэропорт и уже в самом аэропорту девушка постоянно боялась, что ее остановят и не дадут вылететь из страны.

Максима Панкратова тоже начали травить. После передачи его стали узнавать на улицах, даже избивали, угрожали убийством. Сейчас дизайнер просит политического убежища в одной из европейских стран.

Виктория уже полгода находится в Америке. Она даже не думает возвращаться. Мысль о том, что ее могут депортировать в Россию, до сих пор приводит девушку в ужас. Даже если дело закроют, его запросто могут открыть заново.

“Если бы я знала, какие будут последствия, то никогда бы не стала делать эту передачу”, — говорит Пич.

В Лос-Анджелесе Пич совсем одна. Когда она только прилетела, она не знала языка. Сейчас она только начинает учить английский. Карантин, введенный из-за коронавируса, усилил ощущение изолированности. Большую часть времени Вика по-прежнему проводит за созданием развлекательных видео и видео о знаменитостях для YouTube-каналов.  

“Я стараюсь не выходить из дома, многие планы порушились, но мне не привыкать, жизнь и так однажды изменилась на 180 градусов”, — пишет Вика в Instagram под фотографией на фоне Лос-Анджелеса, набравшей почти четыре тысячи лайков. Публично она не рассказывает о том, почему она оказалась в Америке. 

“Мне было хорошо в России, — говорит Вика. — А тут я, получается, изгой, ненужный человек. Друзья не понимают, как это тяжело. Говорят: молодец, уехала! Очень многие мечтают сюда переехать — я не мечтала никогда”. 

Перевод Марины Бочаровой

Мы запустили регулярную рассылку о дезинформации. Подпишитесь, чтобы отличать правду от фейк ньюс. И следите за нами в Телеграме.

Kevin Kurani ganz privat: Kinder, Ehefrau, Herkunft — So lebt der Ex-Nationalspieler heute als ARD-Experte

Für die deutsche Fußball-Nationalmannschaft стенд Кевин Кураньи альс Nationalspieler 52 Mal auf dem Platz. Jetzt ist der ehemalige Profikicker bei der WM als Experte am Start — wie er privat mit Familie. Ehefrau und Kindern lebt, lesen Sie hier.

Экс-футболист Кевин Кураньи выступает за немецкое национальное общество на площади 52 Länderspielen auf dem Platz.Изображение: Марьян Мурат / picture Alliance / dpa

Für eingefleischte Bundesliga-Fans ist der Name Кевин Кураньи ein Begriff — selbst wenn der ehemalige Stürmer seit gut einem Jahr in Kicker-Rente ist. Zu aktiven Zeiten стенд Кевин Кураньи им Kader des VfB Stuttgart, удар FC Schalke 04 и стенд bei Dynamo Moskau unter Vertrag, bevor er seine Profikarriere bei der TSG 1899 Hoffenheim abschloss.Auch international machte sich Kevin Kuranyi einen Namen und Stand in 52 Landerspielen für die deutsche Fußball-Nationalmannschaft на площади Platz. Bei seinen DFB-Einsätzen konnte Kuranyi 19 Tore für sich verbuchen, bevor er seinen letzten Auftritt in der Nationalmannschaft am 6. Сентябрь 2008 г. absolvierte.

Экс-национальный игрок Кевин Кураньи в Fußball-WM für ARD im Einsatz

Doch das Internationale Fußball-Parkett muss trotz Kicker-Rente nicht auf Kevin Kuranyi verzichten.Der Ex-Nationalspieler verstärkt nämlich als Experte bei der Fußball-Weltmeisterschaft in Russland das Team der ARD. Seinen ersten Einsatz habe der frühere Stürmer des VfB Stuttgart und des FC Schalke 04 beim Eröffnungsspiel am 14. Juni in Moskau mit Moderatorin Julia Scharf, teilte der SWR am Dienstag mit. Кураньи войны на Auch Fünf Jahre lang bei Dynamo Moskau unter Vertrag und absolvierte 52 Länderspiele für Deutschland. Nach einer Saison bei der TSG Hoffenheim bedete er im März 2017 seine Profi-Karriere.

«Ich hoffe, ich kann das Team mit meinen Russlanderfahrungen und meinem guten Draht zu vielen Teams und Spielern gut unterstützen», sagte Kuranyi. Er soll bei ausgesuchten WM-Partien an der Seite von Scharf und Ralf Scholt dabei sein. Aus dem SWR-Studio в Баден-Бадене провела анализ среди бывших националистов Томаса Хитцльпергера и Стефана Кунца, а также тренера Ханнеса Вольфа, лучшего WM-участника.

So multikulti ist die Familie des Fußballers Кевин Кураньи

Кевин Кураньи, der mit vollem Namen Кевин Деннис Кураньи Родригес Heißt, erblickte im März 1982 в Рио-де-Жанейро в Brasilien das Licht der Welt.Mütterlicherseits flißt panamaisches Blut in seinen Adern, während Kevin Kuranyis Vater Deutscher ungarischer Herkunft ist. Damit erklären sich auch die verschiedenen Staatsbürgerschaften von Kevin Kurani: Der 26-Jährige hat einen brasilianischen, einen panamaischen und einen deutschen Pass.Seinem Vater hat Kevin Kuranyi auch seinen ungarischen Nachnamen zu verdanken — doch fast immer wird dieser falsch ausgesprochen! Wie im Ungarischen üblich, wird dabei nämlich die erste Silbe betont. Seinen südamerikanischen Wurzeln ist der ehemalige Profikicker eng verbunden, immerhin lebte Kuranyi bis 1997 в Lateinamerica, bevor er nach Deutschland zog.

Кевин Кураньи Частный мит Эхефрау Виктория Пеличич

Vor elf Jahren hat sich Kevin Kuranyi von seinem Single-Leben verabschiedet: Im Mai 2007 läuteten für den ehemaligen Stürmer die Hochzeitsglocken, а также эр сейне Freundin Виктория Пеличич цу сейнер Ehefrau machte. Inzwischen ist aus dem Ehepaar Kuranyi eine richtige Familie geworden: TochterVivien Carmen und Sohn Karlo machen das Familienglück von Viktorija und Kevin Kurani perfekt.

am

Schon gelesen? Privates zu Freundin, Auto, Gehalt, Kontostand — DAS müssen Sie über Torwart Loris Karius wissen .

Folgen Sie News.de schon bei Facebook , Google+ и Twitter ? Он нашел Sie brandheiße News, tolle Gewinnspiele und den direkten Draht zur Redaktion.

loc/kad/news.de/dpa

Анализ экспрессии урацилфосфорибозилтрансферазы в Mycobacterium tuberculosis и оценка нокаутного штамма upp у инфицированных мышей | Письма FEMS по микробиологии

Аннотация

Кодируемая upp ( Rv3309c ) урацилфосфорибозилтрансфераза из Mycobacterium tuberculosis (MtUPRT) превращает урацил и 5-фосфорибозил-α-1-пирофосфат в пирофосфат и уридин-5΄-мононуклеотиды 4-пирофосфаты, предшественники . Нокаутный штамм M.tuberculosis по гену upp был получен путем аллельной замены. Нокаутные и комплементарные штаммы были подтверждены функциональным анализом включения урацила. Показано, что базовый уровень экспрессии MtUPRT не зависит ни от используемой ростовой среды, ни от добавления оснований, ни от присутствия/отсутствия кислорода. Разрушение upp не влияет на рост M.tuberculosis в среде Middlebrook 7H9 и не требуется для M.tuberculosis на мышиной модели инфекции. Таким образом, MtUPRT вряд ли будет хорошей мишенью для препаратов против M.tuberculosis .

ВВЕДЕНИЕ

Туберкулез (ТБ) — это инфекционное заболевание, вызываемое в основном Mycobacterium tuberculosis у людей, которое остается серьезной глобальной проблемой здравоохранения. По оценкам Всемирной организации здравоохранения, в 2015 г. у 10,4 млн человек развился туберкулез, что привело к 1,8 млн смертей (ВОЗ, 2016 г. ).Срочно необходима разработка новых лекарств для лечения туберкулеза, чтобы уменьшить глобальную передачу этого заразного заболевания. Предполагается, что ферменты пиримидинового метаболизма могут стать потенциальными мишенями для разработки противотуберкулезных препаратов (Singh et al . 2015).

Урацилфосфорибозилтрансфераза (UPRT), кодируемая геном upp из M. tuberculosis ( Rv3309c , MtUPRT), катализирует превращение урацила и 5΄-фосфорибозил-α-1΄-пирофосфата в уридин 5΄ монофосфат (UMP) и пирофосфат (Villela et al .2013). UMP, общий предшественник всех пиримидиновых нуклеотидов, синтезируется либо de novo из простых молекул, либо по пути утилизации предварительно сформированных пиримидиновых оснований и нуклеозидов (Warner, Evans and Mizrahi 2014). MtUPRT является ключевым ферментом в пути спасения пиримидина, поскольку он обеспечивает прямое повторное использование урациловых оснований и последующую экономию энергии для клетки (Villela et al . 2011). 5-Фторурацил (5-ФУ) — противораковый препарат, активный в отношении 900–40 М.туберкулез (Цукамура, 1979). MtUPRT катализирует превращение 5-ФУ в монофосфат фторуридина, что является первым этапом сложного механизма действия 5-ФУ (Singh et al. . 2015). В M. tuberculosis метаболиты 5-ФУ включаются в РНК и ДНК, что приводит к генотоксическому стрессу и ингибированию биосинтеза клеточной стенки (Singh et al . 2015). Годе и др. . (2015) предложили перепрофилировать 5-ФУ в качестве противотуберкулезного препарата, описали структуру MtUPRT как основу для химических модификаций в молекуле 5-ФУ и предложили MtUPRT в качестве мишени для разработки противотуберкулезного препарата с вероятной активностью в не- репликация латентного состояния М.туберкулез . Однако никакие экспериментальные данные не показали, играет ли MtUPRT какую-либо роль в нереплицирующейся латентной стадии и/или вирулентности M. tuberculosis . Здесь мы описываем создание нокаутного штамма M. tuberculosis для гена upp (KO), подтверждение нарушения гена upp с помощью функционального анализа и оценку экспрессии MtUPRT в различных условиях роста, включая гипоксию. Влияние делеции upp на in vitro и in vivo M.tuberculosis сравнивали с таковыми на штаммах M. tuberculosis h47Rv дикого типа (WT) и комплементарных (CP).

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Конструирование штамма

Mycobacterium tuberculosis KO

Фрагмент 2006 п.н., содержащий ген upp (624 п.н.) с его фланкирующей областью (911 п.н. вверх по течению и 471 п.н. вниз по течению), амплифицировали с помощью ПЦР из геномной ДНК M. tuberculosis h47Rv с использованием прямой (5΄-agtctagagtagtggctgatggtct -3΄) и обратный (5΄-cttctagaaagcgatcgggcactg-3΄) праймеры, оба содержащие сайтов рестрикции фермента XbaI (подчеркнуты) (фиг. 1А). Этот фрагмент ДНК был клонирован в pUC19 с использованием сайта рестрикции XbaI . Ген upp был разрушен путем вставки канамициновой кассеты из pUC4K (расщепленной с использованием сайта рестрикции фермента HincII ) в уникальный внутренний сайт рестрикции фермента AfeI (фиг. 1B). Вставку высвобождали из производного вектора pUC19 расщеплением XbaI и субклонировали в XbaI линеаризованный вектор pPR27 xylE (pPR27 xylE :: upp kan) (Pelicic 01 al.1997). Mycobacterium tuberculosis h47Rv и h47Ra трансформировали электропорацией с ~ 2 мкг плазмиды pPR27 xylE :: upp kan. Возможные клоны KO обоих штаммов отбирали в два этапа, как описано ранее (Villela et al. . 2015). Выделяли геномную ДНК и проводили реакции ПЦР с использованием геноспецифического скрининга прямого (5΄-acggcggctagtcgccccaa-3΄) и обратного (5΄-gcgcatcacgctgccgtgca-3΄) праймеров для подтверждения аллельной замены в целевой хромосомной области (фиг. 1Б).

Рисунок 1.

Геномное окружение гена upp в M.tuberculosis ( A ), области, клонированные в вектор pPR27 xylE ( B ), электрофорез в агарозном геле из 90KO008s продуктов ПЦР C ) и функциональный анализ для проверки штаммов KO и CP ( D ). (A) Геномная область гена upp , содержащая уникальный внутренний сайт AfeI и фланкирующие гены. (B) Ген upp был разрушен путем вставки канамициновой кассеты (kan R ) в сайт AfeI и клонирован в вектор pPR27 xylE с использованием сайта рестрикции XbaI .Обозначены области отжига ген-специфических скрининговых праймеров вперед (праймер F) и обратный (праймер R). (C) Электрофорез в агарозном геле продуктов ПЦР из возможных клонов KO. S – молекулярный маркер GeneRuler 1 kb DNA Ladder (Thermo Fisher Scientific), ПЦР проводили с: дорожкой 1, геномной ДНК M.tuberculosis h47Rv; дорожки 2–7, возможные клоны KO геномной ДНК. Среди 16 проверенных клонов показаны 6 репрезентативных клонов. (D) Анализ радиоактивного мечения для оценки включения [ 3 H] урацила M.tuberculosis h47Ra штаммы WT, KO и CP. Звездочкой отмечены значительные различия между штаммами WT и KO по апостериорному тесту Бонферрони, * P < 0,05.

Рисунок 1.

Геномное окружение гена upp в M.tuberculosis ( A ), области, клонированные в вектор pPR27 xylE ( B ), клоны продуктов ПЦР в агарозном геле C ) и функциональный анализ для проверки штаммов KO и CP ( D ).(A) Геномная область гена upp , содержащая уникальный внутренний сайт AfeI и фланкирующие гены. (B) Ген upp был разрушен путем вставки канамициновой кассеты (kan R ) в сайт AfeI и клонирован в вектор pPR27 xylE с использованием сайта рестрикции XbaI . Обозначены области отжига ген-специфических скрининговых праймеров вперед (праймер F) и обратный (праймер R). (C) Электрофорез в агарозном геле продуктов ПЦР из возможных клонов KO.S – молекулярный маркер GeneRuler 1 kb DNA Ladder (Thermo Fisher Scientific), ПЦР проводили с: дорожкой 1, геномной ДНК M.tuberculosis h47Rv; дорожки 2–7, возможные клоны KO геномной ДНК. Среди 16 проверенных клонов показаны 6 репрезентативных клонов. (D) Анализ радиоактивного мечения для оценки включения [ 3 H] урацила штаммами M. tuberculosis h47Ra WT, KO и CP. Звездочка представляет значительные различия между штаммами WT и KO по постфактум-критерию Бонферрони, * P < 0.05.

Конструкция

Mycobacterium tuberculosis CP штамма

Ортолог гена upp из M. smegmatis (Msmeg_1694), фланкированный 200 п.н. выше по течению и 100 п.н. ниже по течению, был амплифицирован с помощью ПЦР из геномной ДНК M. smegmatis с использованием прямой (5΄-tgtctagatgcttg-3gtcggcc) (5΄-actctagacgacgatctggccgc-3΄) праймеры, оба содержат сайтов рестрикции XbaI (подчеркнуты). Фрагмент ДНК был клонирован в XbaI , линеаризованный pNIP40/b, интегративный вектор, полученный из микобактериофага Ms6 (Freitas-Vieira, Anes and Moniz-Pereira 1998), с получением pNIP40:: upp .Штаммы CP h47Rv и h47Ra KO были получены путем трансформации KO примерно 2 мкг pNIP40:: upp , как описано ранее (Villela et al. . 2015). KO h47Rv и h47Ra также трансформировали пустой плазмидой pNIP40/b.

Функциональный анализ штаммов

Mycobacterium tuberculosis KO

Чтобы подтвердить разрушение upp в штаммах KO, были проведены эксперименты по радиоактивному мечению, направленные на сравнение способности штаммов h47Ra WT, KO и CP включать урацил.Штаммы Mycobacterium tuberculosis выращивали в среде Middlebrook 7H9 10% ADC (альбумин, декстроза и каталаза) 0,05% Tween-80 при 37°C. Штаммы разбавляли до оптической плотности при 600 нм (ОП 600 ) 0,05 в свежей среде и инкубировали при 37°С в течение ночи. Аликвоты по четыре миллилитра каждого штамма переносили в пробирки Falcon объемом 50 мл, содержащие 0,5 мкКи мл -1 [ 3 H] урацила (удельная радиоактивность 20–30 Ки ммоль -1 ; American Radiolabeled Chemicals, Сент-Луис, Миссури). , США), и пробирки инкубировали при 37°С еще 4 ч при перемешивании.Эти эксперименты проводились в двух экземплярах. Культуры наносили на фильтры (фильтр из стеклянного микроволокна марки GF/A, 25 мм, Whatman, Little Chalfont, Buckinghamshire, United Kingdom) и протягивали через вакуум для удаления среды. Клетки трижды промывали 4 мл 1x PBS (фосфатно-солевой буфер). Добавляли два миллилитра 10% ТФУ (трифторуксусной кислоты) и через 15 мин при 4°С фильтры дважды промывали 2 мл 10% ТФУ и один раз 2 мл 95% этанола. Фильтры переносили в сцинтилляционные флаконы, добавляли жидкий сцинтиллятор и считывали по тритиевому протоколу в жидкостном сцинтилляционном счетчике.Среднее значение включения [ 3 H] урацила h47Ra WT принимали за 100%. Данные были оценены с помощью одностороннего анализа ANOVA с последующим апостериорным тестом Бонферрони с использованием GraphPad Prism 5.0. Различия считались значимыми при уровне достоверности 95%.

Анализ экспрессии MtUPRT в оксигенированных и гипоксических условиях роста

Рост
Mycobacterium tuberculosis h47Ra Экспрессия

MtUPRT в М.tuberculosis h47Ra оценивали в различных условиях роста. Эксперименты в присутствии кислорода проводили в 125-мл колбах Эрленмейера, содержащих 25 мл среды Миддлбрука 7Н9 10% ADC 0,05% твин-80 или среды Сотона 0,025% тилоксапола, при 37°С при перемешивании (140 об/мин). Экстракты белков собирали в четыре разных момента времени для каждой среды. Экспрессию MtUPRT в среде Сотона также оценивали в присутствии 20 мкг мл -1 каждой из следующих комбинаций оснований: урацил; урацил, тимин и цитозин; аденин и гуанин; урацил, тимин, цитозин, аденин и гуанин. Эти основания добавляли в начале культивирования или за 48 ч до приготовления белковых экстрактов, когда OD 600 культуры достигала 0,8. Как описано Wayne and Hayes (1996), в средах Middlebrook 7H9 и Sauton создавались гипоксические условия. Белковые экстракты собирали через 1, 2, 3 и 4 недели кислородного истощения. Контроли для каждой временной точки выращивали с частично закрытой крышкой, чтобы обеспечить оксигенацию. Метиленовый синий (1,5 мкг мл -1 ), цветовой индикатор анаэробного состояния, добавляли в две контрольные пробирки: одну в гипоксическом состоянии (плотно закрытая крышка) и другую в насыщенном кислородом состоянии (частично закрытая крышка).Оксигенированный контроль должен быть синим в течение всего эксперимента, если присутствует кислород, а гипоксический контроль должен стать белым через несколько дней.

Экстракция белка

Клеточные осадки (0,1 г) дважды промывали PBS, суспендировали в 1 мл того же буфера и затем переносили в пробирки с лизирующей матрицей В объемом 2 мл, содержащие гранулы кремнезема диаметром 0,1 мм (MP Biomedicals, Санта-Ана, Калифорния, США). Клетки разрушали с помощью насадки MP Fast Prep Bead Beater (MP Biomedicals) при скорости 6.0 м с −1 , 8 циклов по 40 с, охлаждение между циклами. После лизиса бесклеточные супернатанты собирали центрифугированием при 14 000 об/мин в течение 20 мин при 4°C. Концентрацию общего белка измеряли с помощью анализа белка BCA (Thermo Fisher Scientific, Уолтем, Массачусетс, США).

Вестерн-блоттинг

белка микобактерий (20 мкг) наносили на гели NuPAGE 10% Bis-Tris (Invitrogen, Карлсбад, Калифорния, США) и переносили на нитроцеллюлозные мембраны (iBlot Invitrogen).Блоты блокировали 3% обезжиренным сухим молоком, 0,05% Tween-20 в TBS (T-TBS) и зондировали поликлональными мышиными антителами против MtUPRT в разведении 1:250. Поликлональное мышиное антитело против MtUPRT получали путем иммунизации мыши очищенным белком MtUPRT (Villela et al. , 2013), содержащим неполный адъювант Фрейнда. Мембраны трижды промывали T-TBS и использовали пероксидазно-конъюгированные антимышиные вторичные антитела (Sigma-Aldrich, Сент-Луис, Миссури, США) в разведении 1:5000. Субстрат Pierce ECL Western Blotting Substrate (Thermo Fisher Scientific) использовали для детекции с помощью авторадиографической пленки Kodak BioMax Light (Carestream Health, Rochester, NY, USA).

Рост в аксенических средах

Mycobacterium tuberculosis h47Rv WT, KO и CP посев начинали при OD 600 0,02–0,04 в Миддлбруке 7H9 10% ADC 0,05% Tween-80, в двух повторностях, при 37°C, при перемешивании (100 об/мин) . Аликвоты отбирали из каждой культуры через 8, 11, 13 и 19 дней и измеряли OD 600 .Данные были оценены с помощью двустороннего анализа ANOVA с последующим апостериорным тестом Бонферрони с использованием GraphPad Prism 5.0. Различия считались значимыми при уровне достоверности 95%.

Заражение мышей

самца мышей Swiss внутривенно инфицировали 5 × 10 5 колониеобразующих единиц (КОЕ) штаммов M. tuberculosis h47Rv WT, KO или CP, как описано ранее (Rodrigues-Junior et al. . 2012). Мышей подвергали эвтаназии через 30 дней после заражения; селезенку и легкие удаляли в асептических условиях и гомогенизировали.Бактериальную нагрузку в органах подсчитывали после посева серийных разведений гомогенатов на Миддлбрук 7 ч 20 мин 10% OADC и культивирования в течение 21 дня при 37°С. Значения выражали как среднее ± стандартная ошибка среднего логарифма КОЕ в легких или селезенке, полученных для четырех животных в каждой группе. Эксперименты на животных проводили в соответствии с протоколами, ранее одобренными Институциональным комитетом по этике животных (номер протокола: 13/00355).

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

Мутанты upp KO Mycobacterium tuberculosis h47Rv и h47Ra были получены путем аллельной замены с использованием плазмиды pPR27 xylE , которая содержит термочувствительный ориджин репликации, репортерный ген xylE и sac sac (Пеличич и др. .1997). Электрофорез в агарозном геле продуктов ПЦР из 16 клонов, скринированных на upp KO, показал полосу 3458 п.н., совместимую с аллельным обменом в локусе upp (рис. 1C). Штаммы KO трансформировали пустой плазмидой pNIP40 и pNIP40:: upp для получения штамма СР. Для проверки штаммов KO и CP штаммы M.tuberculosis h47Ra WT, KO и CP сравнивали на включение урацила путем метаболического мечения [ 3 H] урацилом.Штаммы, полученные из M.tuberculosis h47Ra, использовали для проведения этого эксперимента из-за проблем безопасности, связанных с радиоактивным материалом и патогенностью штамма h47Rv. Как показано на рис. 1D, имело место 100-кратное снижение включения урацила в штамм KO по сравнению с h47Ra WT. Включение ~1% урацила, обнаруженное в штамме KO по сравнению с WT (рис. 1D), вероятно, связано с активностью PyrR, белка, который регулирует экспрессию генов биосинтеза пиримидиннуклеотидов и обладает слабым UPRT. активности (Кантарджиев и др. .2005). Этот результат согласуется с ферментативными данными, описанными ранее, которые показали, что активность MtUPRT значительно выше, чем у PyrR (Singh et al . 2015). Комплементация штамма KO ортологом гена upp из M. smegmatis восстанавливала включение урацила, хотя и до более низкого уровня, чем у штамма WT (рис. 1D). Эти результаты подтверждают штаммы KO и CP и подтверждают активность функции MtUPRT в M. tuberculosis .

Экспрессию MtUPRT оценивали в оксигенированных и гипоксических условиях роста в M.tuberculosis h47Ra с помощью вестерн-блоттинга. Штамм h47Ra Mycobacterium tuberculosis использовали для оценки экспрессии MtUPRT, чтобы включить оксигенированный контроль модели Уэйна (частично закрытая крышка), который не может быть выполнен со штаммом h47Rv из соображений безопасности. Mycobacterium tuberculosis выращивали в присутствии кислорода на средах Миддлбрука 7Н9 и Сотона. Белковые экстракты из М. tuberculosis , выращенные в среде Middlebrook 7H9, собирали при OD 600 0,7, 1,4, 1,8 (10 дней роста) и 1,81 (15 дней роста), а в среде Сотона собирали при OD 600 и 0,7, 1,4. , 2.1 и 2.4. MtUPRT (21,9 кДа), по-видимому, продуцировался на одинаковых уровнях во все временные точки кривой роста в средах Middlebrook 7H9 и Sauton (рис. 2). Экспрессию MtUPRT в среде Сотона также оценивали в присутствии различных комбинаций оснований, как описано в разделе «Материалы и методы».Как показано на рис. 2, экспрессия MtUPRT не индуцировалась добавлением пуриновых и/или пиримидиновых оснований в начале роста культуры или за 48 ч до сбора белковых экстрактов по сравнению с контролем (без добавления основания). Более того, через 1 и 2 недели гипоксического роста M.tuberculosis h47Ra (модель Уэйна) в среде Middlebrook 7H9 (рис. 2) уровень экспрессии MtUPRT не изменился по сравнению с контролем (оксигенированные условия роста), в то время как через 3 и 4 недели в контроле наблюдается небольшое увеличение экспрессии MtUPRT (рис. 2). Аналогичные результаты были получены при моделировании Уэйна в среде Саутона (рис. 2). Таким образом, гипоксические условия роста M.tuberculosis , по-видимому, не индуцируют экспрессию MtUPRT в использованных здесь экспериментальных условиях. Полоса 67 кДа, обнаруженная поликлональным антителом против MtUPRT (фиг. 2), была идентифицирована с помощью ЖХ-МС/МС как белок-шаперон DnaK из M. tuberculosis h47Ra (данные не показаны). Обнаружение микобактериального шаперонного белка DnaK с помощью поликлонального антитела Anti-MtUPRT, вероятно, связано с загрязнением препарата белка MtUPRT ДНК из Escherichia coli , поскольку он был получен в E.палочка . Эта гипотеза была подтверждена обнаружением очищенного белка E. coli DnaK при проведении вестерн-блоттинга с поликлональным антителом против MtUPRT (данные не показаны). Штамм также выращивали в виде поверхностной пленки на среде Саутона без тилоксапола и готовили белковые экстракты в ранней и конечной фазах роста; однако тот же уровень экспрессии белка MtUPRT снова был обнаружен в обе временные точки (данные не показаны). Таким образом, белок MtUPRT, по-видимому, имеет базовый уровень экспрессии, который не зависит от среды, фазы роста, добавления пуриновых и пиримидиновых оснований и наличия или отсутствия кислорода.

Рисунок 2.

Анализ экспрессии MtUPRT в различных условиях роста M.tuberculosis h47Ra методом вестерн-блоттинга. S — точность молекулярного маркера плюс двойной цветовой стандарт белка (BioRad). Полосы 1, 2, 3 – очищенный MtUPRT (21,9 кДа) 20, 10, 5 нг соответственно. Двадцать микрограммов общего белка добавляли к каждой из следующих дорожек. Дорожки 4 и 9 — контроль, без добавления базы. Дорожки 5 и 10 — добавление урацила. Дорожки 6 и 11 — добавление урацила, цитозина и тимина.Дорожки 7 и 12 — добавление аденина и гуанина. Дорожки 8 и 13 — добавление всех оснований. Дорожки 14, 15, 16 и 17 — кривая роста в среде Сотона, полученная при OD 600 0,7, 1,4, 2,1 и 2,4 соответственно. Дорожки 18, 19, 20 и 21 — кривая роста в среде Миддлбрук 7Н9, собранная при ОП 600 0,7, 1,4, 1,8 (10 дней роста), 1,8 (15 дней роста) соответственно. Дорожки 22–37 — модель Уэйна (W), оценка экспрессии белка через 1, 2, 3 и 4 недели истощения кислорода по сравнению с контролем (C, частично закрытая крышка) в средах Middlebrook 7H9 и Sauton.

Рисунок 2.

Анализ экспрессии MtUPRT в различных условиях роста M.tuberculosis h47Ra методом вестерн-блоттинга. S — точность молекулярного маркера плюс двойной цветовой стандарт белка (BioRad). Полосы 1, 2, 3 – очищенный MtUPRT (21,9 кДа) 20, 10, 5 нг соответственно. Двадцать микрограммов общего белка добавляли к каждой из следующих дорожек. Дорожки 4 и 9 — контроль, без добавления базы. Дорожки 5 и 10 — добавление урацила. Дорожки 6 и 11 — добавление урацила, цитозина и тимина.Дорожки 7 и 12 — добавление аденина и гуанина. Дорожки 8 и 13 — добавление всех оснований. Дорожки 14, 15, 16 и 17 — кривая роста в среде Сотона, полученная при OD 600 0,7, 1,4, 2,1 и 2,4 соответственно. Дорожки 18, 19, 20 и 21 — кривая роста в среде Миддлбрук 7Н9, собранная при ОП 600 0,7, 1,4, 1,8 (10 дней роста), 1,8 (15 дней роста) соответственно. Дорожки 22–37 — модель Уэйна (W), оценка экспрессии белка через 1, 2, 3 и 4 недели истощения кислорода по сравнению с контролем (C, частично закрытая крышка) в средах Middlebrook 7H9 и Sauton.

Рост штаммов M.tuberculosis h47Rv WT, KO и CP сравнивали, чтобы определить, повлияло ли разрушение upp на скорость роста вирулентного M.tuberculosis в течение культивирования in vitro в среде Middlebrook 7H9. Никаких существенных различий между штаммами не было обнаружено после двухфакторного анализа ANOVA с последующим апостериорным тестом Бонферрони (рис. 3А). Чтобы оценить, участвует ли ген upp в вирулентности M.tuberculosis , способность штамма KO инфицировать и выживать в мышиной модели сравнивали со штаммами h47Rv WT и CP.На 30-й день после заражения мышей подвергали эвтаназии, а жизнеспособные бактерии в селезенке и легких культивировали и подсчитывали. Статистически значимой разницы в бактериальной нагрузке как в селезенке, так и в легких не наблюдалось между группами инфицированных через 30 дней после инфицирования (рис. 3В). Таким образом, результаты показывают, что ген upp не требуется для вирулентности M.tuberculosis h47Rv в модели инфекции in vivo . Эти наблюдения могут быть объяснены избыточностью, обнаруженной в метаболизме нуклеотидов у 900–40 M.туберкулез . Нуклеотиды синтезируются либо de novo из простых молекул, либо по пути утилизации предварительно образованных оснований и нуклеозидов. В то время как MtUPRT катализирует превращение урацила в UMP (предшественник всех пиримидиновых нуклеотидов) на одной ферментативной стадии, ферменты синтеза пиримидиновых нуклеотидов de novo синтезируют UMP на шести ферментативных стадиях и могут компенсировать отсутствие upp. в штамме КО. Поскольку синтез нуклеозидов de novo является энергозатратным процессом, было высказано предположение, что M.tuberculosis предпочтительно использует путь утилизации для поддержания пула нуклеотидов в условиях персистирующей инфекции или низкой доступности энергии (Villela et al , 2011; Warner, Evans and Mizrahi 2014). Однако пока нет экспериментальных данных, показывающих участие пути утилизации нуклеотидов в нереплицирующемся латентном состоянии M.tuberculosis.

Рисунок 3.

Характеристика штамма M.tuberculosis h47Rv KO для upp гена in vitro ( A ) и in vivo ( B ).(A) M ycobacterium tuberculosis h47Rv Культуры WT (черные столбцы), KO (белые столбцы) и CP (серые столбцы) были начаты при OD 600 0,02–0,04 в среде Миддлбрука 7H9 в повторах, и OD 600 измеряли через 8, 11, 13 и 19 дней. (B) Влияние КО гена upp на заражение и выживаемость M.tuberculosis через 30 дней после заражения в селезенке и легких мышей. Результаты выражены в виде средних чисел логарифмов КОЕ от каждого органа, полученных для четырех животных в каждой группе.

Рисунок 3.

Характеристика штамма M.tuberculosis h47Rv KO для upp гена in vitro ( A ) и in vivo (

8 B 9).

(A) M ycobacterium tuberculosis h47Rv Культуры WT (черные столбцы), KO (белые столбцы) и CP (серые столбцы) были начаты при OD 600 0,02–0,04 в среде Миддлбрука 7H9 в повторах, и OD 600 измеряли через 8, 11, 13 и 19 дней. (B) Влияние KO гена upp на инфекцию и выживаемость M.tuberculosis через 30 дней после заражения в селезенке и легких мышей. Результаты выражены в виде средних чисел логарифмов КОЕ от каждого органа, полученных для четырех животных в каждой группе.

В этой работе мы сконструировали штаммов M.tuberculosis KO и CP для гена upp , провели эксперименты по радиоактивному мечению для оценки включения урацила штаммами KO и CP, оценили экспрессию MtUPRT в присутствии и в отсутствие кислорода в среду и оценили штамм КО на рост in vitro и на мышиной модели М.инфекция туберкулез . Наши результаты показали, что, хотя MtUPRT является ключевым ферментом пути спасения пиримидина, поскольку он непосредственно синтезирует UMP из урацила, его уровни остаются постоянными в условиях гипоксии. Соответственно, MtUPRT, по-видимому, не играет значительной роли в нереплицирующейся латентной стадии M.tuberculosis in vitro . Кроме того, результаты, описанные в нем, предполагают, что ген upp не требуется для полной вирулентности M.tuberculosis у мышей в модели, протестированной в этом исследовании.В заключение, MtUPRT вряд ли будет хорошей мишенью для разработки противотуберкулезных препаратов.

ФИНАНСИРОВАНИЕ

Эта работа была поддержана Национальным советом по научно-техническому развитию (Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico, CNPq, Бразилия) [номер гранта 441720/2014-5] и Бразильским банком развития (Banco Nacional de Desenvolvimento Econômico e Social, BNDES, Бразилия) [номер гранта 14.2.0914.1]. ADV признает стипендию Координационного совета по улучшению кадров высшего образования (Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior, CAPES, Бразилия) [BEX 1425/10-2] и VRJ Фонда поддержки исследований штата Рио-Гранде. Sul (Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio Grande do Sul, FAPERGS, Бразилия) — CAPES [DOCFIX 05/2013].

Конфликт интересов . Не объявлено.

ССЫЛКИ

Фрейташ-Виейра

А

Анес

Е

Мониш-Перейра

Дж

.

Сайт-специфический локус рекомбинации микобактериофага Ms6 определяет интеграцию ДНК в ген тРНК (Ala) Mycobacterium spp

.

Микробиология

1998

;

144

:

3397

406

.

Годе

Р

Йобихен

С

Рамачандран

С

и другие. .

Структурная основа картирования спонтанных мутаций с 5-фторурацилом в урацилфосфорибозилтрансферазе из Mycobacterium tuberculosis

.

Biochem Bioph Res Comm

2015

;

467

:

577

82

.

Кантарджиев

КА

Васкес

С

Кастро

Р

и другие. .

Структура pyrR (Rv1379) из Mycobacterium tuberculosis : ген персистентности и белок-мишень для лекарственного средства

.

Acta Crystallogr D Biol Crystallogr

2005

;

61

:

355

64

.

Пеличич

В

Джексон

М

Рейрат

ДжМ

и другие. .

Эффективный аллельный обмен и мутагенез транспозонов в Mycobacterium tuberculosis

.

P Natl Acad Sci USA

1997

;

94

:

10955

60

.

Родригес-Жуниор

В

Дос Сантос

А

Сантос

АДЖ

и другие. .

Активность IQG-607, нового перорально активного соединения, в мышиной модели инфекции Mycobacterium tuberculosis

.

Int J Antimicrob Ag

2012

;

40

:

182

5

.

Сингх

В

Бречик

М

Мукерджи

Р

и другие. .

Комплексный механизм антимикобактериального действия 5-фторурацила

.

Хим Биол

2015

;

22

:

63

75

.

Цукамура

М

.

In vitro чувствительность микобактерий, особенно Mycobacterium intracellulare , к 5-фторурацилу и характер развития устойчивости Mycobacterium tuberculosis к препарату

.

Микробиол Иммунол

1979

;

23

:

427

9

.

Виллела

г. н.э.

г.

Дукати

РГ

Росадо

ЛА

и другие. .

Биохимическая характеристика урацилфосфорибозилтрансферазы из Mycobacterium tuberculosis

.

PLoS One

2013

;

8

:

e56445

.

Виллела

г. н.э.

г.

Эйхлер

Р

Пинто

АСМ

и другие. .

Методы замены генов и количественной масс-спектрометрии подтверждают, что гуанозинмонофосфатсинтетаза необходима для роста Mycobacterium tuberculosis

.

Biochem Biophys Rep

2015

;

4

:

277

82

.

Виллела

г. н.э.

г.

Санчес-Китиан

ЗА

Дукати

РГ

и другие. .

Пиримидиновый путь спасения в Mycobacterium tuberculosis

.

Curr Med Chem

2011

;

18

:

1286

98

.

Уорнер

ДФ

Эванс

ДЖК

Мизрахи

В

.

Метаболизм нуклеотидов и репликация ДНК

.

Микробиол Спектр

2014

;

2

(

5

):.

Уэйн

ЛГ

Хейс

ЛГ

.

Модель in vitro для последовательного изучения снижения уровня Mycobacterium tuberculosis через две стадии нереплицирующейся персистенции

.

Infect Immun

1996

;

64

:

2062

9

.

Всемирная организация здравоохранения

.

Global Tuberculosis Report

Geneva

:

WHO Press

.

2016

.

Совместное культивирование ультрамалых паразитирующих в окружающей среде бактерий с литической способностью против бактерий, связанных с пеной сточных вод

  • 1.

    Seviour, R. J. & Nielsen, P. H. Microbial Ecology of Activated Sludge (IWA Publishing, 2010).

  • 2.

    Batinovic, S. et al. Бактериофаги в естественных и искусственных средах. Патогены 8 , 100 (2019).

    КАС ПабМед Центральный Google Scholar

  • 3.

    Петровски С., Севиур Р. Дж. и Тиллетт Д. Предотвращение образования стабилизированной пены Gordonia и Nocardia с помощью бактериофага GTE7. Заяв. Окружающая среда. микробиол. 77 , 7864–7867 (2011).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 4.

    Петровски С., Севиур Р.Дж. и Тиллетт Д. Характеристика генома поливалентного литического бактериофага GTE2, обладающего потенциалом биоконтроля Gordonia -, Rhodococcus — и Nocardia -стабилизированные пены в установках с активным илом. Заяв. Окружающая среда. микробиол. 77 , 3923–3929 (2011).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 5.

    Nielsen, P.H., Kragelund, C., Seviour, R.J. & Nielsen, J.L. Идентификация и экофизиология нитчатых бактерий в активном иле. FEMS Microbiol. 33 , 969–998 (2009).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 6.

    De los Reyes, F. in Microbial Ecology of Activated Sludge (eds Seviour, RJ & Nielsen, P.H.) 215–258 (IWA Publishing, 2010).

  • 7.

    Ваннер, Дж., Kragelund, C. & Nielsen, PH в Microbial Ecology of Activated Sludge (под редакцией Seviour, RJ & Nielsen, PH) 191–214 (издательство IWA, 2010).

  • 8.

    Soddell, J. & Seviour, R. J. Микробиология пенообразования на заводах по производству активного ила. J. Appl. бактериол. 69 , 145–176 (1990).

    КАС Google Scholar

  • 9.

    Тандой, В., Россетти, С. и Ваннер, Дж. Проблемы разделения активного ила: теория, меры контроля, практический опыт (Издательство IWA, 2017).

  • 10.

    Kragelund, C. et al. Экофизиология актинобактерий (Mycolata), содержащих миколовую кислоту, в пенах активного ила. FEMS Microbiol. Экол. 61 , 174–184 (2007).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 11.

    Lechevalier, M.P. & Lechevalier, H.A. Nocardia amarae sp. nov., актиномицета, распространенного в пенообразующем активном иле. Междунар. Дж. Сист. бактериол. 24 , 278–288 (1974).

    Google Scholar

  • 12.

    de los Reyes, F.L. III, Rothauszky, D. & Raskin, L. Структуры микробных сообществ в полномасштабных очистных сооружениях с пенообразованием и без пенообразования. Водная среда. Рез. 74 , 437–449 (2002).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 13.

    Винклер М.К., Кребер Э., Мон, В.В., Кох, Ф. и Фригон, Д. Сравнение микробных популяций и динамики пенообразования в обычных системах биологического удаления фосфора и мембранных. Водная среда. J. 30 , 102–112 (2016).

    КАС Google Scholar

  • 14.

    Пал, П., Хайрнар, К. и Пауникар, В. Н. Причины и способы устранения нитевидного пенообразования на установке по обработке активного ила. Глоб. Гнездо Дж. 16 , 762–772 (2014).

    Google Scholar

  • 15.

    Lemmer, H. & Kroppenstedt, R.M. Хемотаксономия и физиология некоторых актиномицетов, выделенных из активного ила. Сист. заявл. микробиол. 5 , 124–135 (1984).

    Google Scholar

  • 16.

    Аух, А.Ф., фон Ян, М., Кленк, Х.-П. & Göker, M. Цифровая гибридизация ДНК и ДНК для разграничения микробных видов посредством сравнения последовательностей генома с геномом. Подставка. Геном. науч. 2 , 117–134 (2010).

    Google Scholar

  • 17.

    Горис, Дж. и др. Значения гибридизации ДНК-ДНК и их связь со сходством последовательностей всего генома. Междунар. Дж. Сист. Эвол. микробиол. 57 , 81–91 (2007).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 18.

    Константинидис, К. Т. и Тидже, Дж.М. На пути к таксономии прокариот на основе генома. J. Бактериол. 187 , 6258–6264 (2005).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 19.

    Chaumeil, P.-A., Mussig, A.J., Hugenholtz, P. & Parks, D.H. GTDB-Tk: набор инструментов для классификации геномов с помощью базы данных таксономии генома. Биоинформатика 36 , 1925–1927 (2020).

    КАС Google Scholar

  • 20.

    Петровски С., Тиллетт Д. и Севьюур Р. Дж. Геномные последовательности и характеристика родственных фагов Gordonia GTE5 и GRU1 и их использование в качестве потенциальных агентов биоконтроля. Заяв. Окружающая среда. микробиол. 78 , 42–47 (2012).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 21.

    Dyson, Z.A., Tucci, J., Seviour, R.J. & Petrovski, S. Lysis to kill: оценка литических способностей и геномика девяти бактериофагов, инфекционных для Gordonia spp.и их потенциальное использование в биоконтроле пены активного ила. PLoS ONE 10 , e0134512 (2015).

    ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 22.

    Рассел, Д. А. и Хатфул, Г. Ф. PhagesDB: база данных актинобактериофагов. Биоинформатика 33 , 784–786 (2017).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 23.

    Гольдфарб, Т. и др. BREX — это новая система устойчивости к фагам, широко распространенная в микробных геномах. EMBO J. 34 , 169–183 (2015).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 24.

    He, X. et al. Культивирование ассоциированного с человеком филотипа TM7 выявляет редуцированный геном и эпибиотический паразитический образ жизни. Проц. Натл акад. науч. США 112 , 244–249 (2015).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 25.

    Кросс, К.Л. и др. Целенаправленное выделение и культивирование некультивируемых бактерий методом обратной геномики. Нац. Биотехнолог. 37 , 1314–1321 (2019).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 26.

    Collins, A.J., Murugkar, P.P. & Dewhirst, F.E. Полная последовательность генома штамма AC001, нового культивируемого члена микробиома полости рта человека из кандидатного типа Saccharibacteria (TM7). Микробиолог. Ресурс. Объявить 8 , e01158-19 (2019).

    ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 27.

    Brown, C.T. et al. Необычная биология в группе, включающей более 15% доменных бактерий. Природа 523 , 208–211 (2015).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 28.

    Бор, Б. и др. Быстрая эволюция снижения восприимчивости хозяина приводит к стабильным отношениям между ультрамалым паразитом TM7x и его бактериальным хозяином. Проц. Натл акад. науч. США 115 , 12277–12282 (2018).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 29.

    Albertsen, M. et al. Последовательности геномов редких некультивируемых бактерий, полученные путем дифференцированного объединения нескольких метагеномов. Нац. Биотехнолог. 31 , 533–538 (2013).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 30.

    Starr, E.P. et al. Метагеномика, основанная на стабильных изотопах, с разрешением генома показывает, что сахарибактерии используют обработанный микроорганизмами углерод растительного происхождения. Микробиом 6 , 122 (2018).

    ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 31.

    Kantor, R. S. et al. Небольшие геномы и редкий метаболизм бактерий, связанных с отложениями, из четырех типов-кандидатов. mBio 4 , e00708-13 (2013).

    ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 32.

    McLean, J. S. et al. Приобретение и адаптация ультрамалых паразитарных бактерий с уменьшенным геномом к хозяевам-млекопитающим. Cell Rep. 32 , 107939 (2020).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 33.

    Mattick, J. S. Пили IV типа и подергивания подвижности. год.Преподобный Микробиолог. 56 , 289–314 (2002).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 34.

    Bernheim, A. & Sorek, R. Паниммунная система бактерий: противовирусная защита как ресурс сообщества. Нац. Преподобный Микробиолог. 18 , 113–119 (2020).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 35.

    Борнеман Дж. и Триплетт Э.W. Молекулярное микробное разнообразие в почвах восточной Амазонии: свидетельство необычных микроорганизмов и изменений микробной популяции, связанных с обезлесением. Заяв. Окружающая среда. микробиол. 63 , 2647–2653 (1997).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 36.

    Zhang, L. et al. Бактериальные и архейные сообщества в глубоководных отложениях неактивных гидротермальных источников на юго-западе Индийского хребта. наук. 6 , 25982 (2016).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 37.

    Dewhirst, F. E. et al. Микробиом ротовой полости человека. J. Бактериол. 192 , 5002–5017 (2010).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 38.

    Бонд, П. Л., Хугенхольц, П., Келлер, Дж. и Блэколл, Л.L. Структуры бактериального сообщества активного ила, удаляющего и не удаляющего фосфаты, из реакторов периодического действия. Заяв. Окружающая среда. микробиол. 61 , 1910–1916 (1995).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 39.

    Castelle, C.J. et al. Биосинтетическая способность, метаболическое разнообразие и необычная биология в излучении CPR и DPANN. Нац. Преподобный Микробиолог. 16 , 629–645 (2018).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 40.

    Hahn, H. P. Пилюс типа 4 является основным связывающим вирулентность адгезином Pseudomonas aeruginosa — обзор. Ген 192 , 99–108 (1997).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 41.

    Мазариего-Эспиноса, К., Круз, А., Ледесма, М.А., Очоа, С.А. и Шикохтенкатль-Кортес, Дж.Longus, тип IV энтеротоксигенной кишечной палочки Escherichia coli , участвует в прикреплении к эпителиальным клеткам кишечника. J. Бактериол. 192 , 2791–2800 (2010).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 42.

    Brown, DR, Helaine, S., Carbonnelle, E. & Pelicic, V. Систематический функциональный анализ показывает, что набор из семи генов участвует в тонкой настройке множественных функций, опосредованных пилями IV типа в Neisseria meningitidis . Заразить. Иммун. 78 , 3053–3063 (2010).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 43.

    Rodgers, K., Arvidson, C.G. & Melville, S. Экспрессия пилина Clostridium perfringens типа IV с помощью Neisseria gonorrhoeae опосредует прилипание к мышечным клеткам. Заразить. Иммун. 79 , 3096–3105 (2011).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 44.

    Evans, K. J., Lambert, C. & Sockett, R. E. Хищничество с помощью Bdellovibrio bacteriovorus HD100 требует пили типа IV. J. Бактериол. 189 , 4850–4859 (2007).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 45.

    Mahmoud, K.K. & Koval, S.F. Характеристика пили типа IV в жизненном цикле бактерии-хищника Bdellovibrio . Микробиология (чтение) 156 , 1040–1051 (2010).

    КАС Google Scholar

  • 46.

    Чаньи Р. М. и Коваль С. Ф. Роль пилей типа IV в хищничестве Bdellovibrio bacteriovorus . PLoS ONE 9 , e113404 (2014).

    ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 47.

    Wong, W.Y. et al. Структурно-функциональный анализ адгезионно-связывающего домена на пилине штаммов Pseudomonas aeruginosa PAK и KB7. Биохимия 34 , 12963–12972 (1995).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 48.

    Utter, D.R., He, X., Cavanaugh, C.M., McLean, J.S. & Bor, B. Сахарибактерия TM7x вызывает дифференцированные реакции в пределах диапазона хозяина. ISME J. 14 , 3054–3067 (2020).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 49.

    Скерман В. Новый тип микроманипулятора и микрокузницы. J. Gen. Microbiol. 54 , 287–297 (1968).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 50.

    Петровски С., Севиур Р. Дж. и Тиллетт Д. Геномная последовательность и характеристика Tsukamurella бактериофага TPA2. Заяв. Окружающая среда. микробиол. 77 , 1389–1398 (2011).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 51.

    Сантос, Массачусетс. Усовершенствованный метод мелкомасштабного приготовления ДНК бактериофага, основанный на осаждении фага хлоридом цинка. Рез. нуклеиновых кислот. 19 , 5442 (1991).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 52.

    Martin, M. Cutadapt удаляет последовательности адаптеров из считываний высокопроизводительного секвенирования. EMBnet J. 17 , 10–12 (2011).

    Google Scholar

  • 53.

    Вик, Р. Р., Джадд, Л. М., Горри, С. Л. и Холт, К. Э. Unicycler: определение сборок бактериального генома из коротких и длинных ридов секвенирования. Вычисление PLoS. биол. 13 , e1005595 (2017).

    ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 54.

    Стечер Г., Тамура К. и Кумар С. Молекулярно-эволюционный генетический анализ (MEGA) для macOS. Мол. биол. Эвол. 37 , 1237–1239 (2020).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 55.

    Saitou, N. & Nei, M. Метод объединения соседей: новый метод реконструкции филогенетических деревьев. Мол. биол. Эвол. 4 , 406–425 (1987).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 56.

    Felsenstein, J. Доверительные пределы филогении: подход с использованием начальной загрузки. Эволюция 39 , 783–791 (1985).

    Google Scholar

  • 57.

    Тамура К. и Ней М. Оценка количества нуклеотидных замен в контрольной области митохондриальной ДНК у человека и шимпанзе. Мол. биол. Эвол. 10 , 512–526 (1993).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 58.

    Fitch, W. M. На пути к определению курса эволюции: минимальное изменение топологии конкретного дерева. Сист. Зоол. 20 , 406–416 (1971).

    Google Scholar

  • 59.

    Рихтер, М., Росселло-Мора, Р., Оливер Глекнер, Ф. и Пепли, Дж. JSpeciesWS: веб-сервер для описания прокариотических видов на основе попарного сравнения геномов. Биоинформатика 32 , 929–931 (2016).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 60.

    Родригес-Р., Л. М. и Константинидис, К. Т. Коллекция энвеомики: набор инструментов для специализированного анализа микробных геномов и метагеномов. Препринт на Препринты PeerJ https://doi.org/10.7287/peerj.preprints.1900v1 (2016).

  • 61.

    Meier-Kolthoff, J. P. & Göker, M. TYGS — это автоматизированная высокопроизводительная платформа для современной таксономии на основе генома. Нац. коммун. 10 , 2182 (2019).

    ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 62.

    R Основная команда. R: язык и среда для статистических вычислений (R Foundation for Statistical Computing, 2019).

  • 63.

    Галили, Т., О’Каллаган, А., Сиди, Дж. и Сиверт, К. Heatmaply: пакет R для создания интерактивных тепловых карт кластера для публикации в Интернете. Биоинформатика 34 , 1600–1602 (2018).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 64.

    Дорогая, А.Э., Мау, Б. и Перна, Н. Т. ProgressiveMauve: множественное выравнивание генома с увеличением, потерей и перестройкой генов. PLoS ONE 5 , e11147 (2010 г.).

    ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 65.

    Guy, L., Roat Kultima, J. & Andersson, S. genoPlotR: сравнительная визуализация генов и генома в R. Bioinformatics 26 , 2334–2335 (2010).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 66.

    Page, A.J. et al. Roary: быстрый крупномасштабный пангеномный анализ прокариот. Биоинформатика 31 , 3691–3693 (2015).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 67.

    Seemann, T. Prokka: быстрая аннотация генома прокариот. Биоинформатика 30 , 2068–2069 (2014).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 68.

    Huerta-Cepas, J. et al. Быстрая функциональная аннотация всего генома посредством назначения ортологии с помощью eggNOG-mapper. Мол. биол. Эвол. 34 , 2115–2122 (2017).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 69.

    Huerta-Cepas, J. et al. eggNOG 5.0: иерархический, функционально и филогенетически аннотированный ресурс ортологии, основанный на 5090 организмах и 2502 вирусах. Рез. нуклеиновых кислот. 47 , Д309–Д314 (2019).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 70.

    Татусова Т. и др. Конвейер аннотации прокариотического генома NCBI. Рез. нуклеиновых кислот. 44 , 6614–6624 (2016).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 71.

    Ю, Ю., Оуян, Ю. и Яо, В. ShinyCircos: приложение R/Shiny для интерактивного создания сюжета Circos. Биоинформатика 34 , 1229–1231 (2018).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 72.

    Zimmermann, L. et al. Полностью переработанный инструментарий биоинформатики MPI с новым сервером HHpred в основе. Дж. Мол. биол. 430 , 2237–2243 (2018).

    КАС Google Scholar

  • 73.

    Робертс Р. Дж., Винче Т., Посфаи Дж.& Macelis, D. REBASE — база данных по рестрикции и модификации ДНК: ферменты, гены и геномы. Рез. нуклеиновых кислот. 43 , Д298–Д299 (2015).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 74.

    Couvin, D. et al. CRISPRCasFinder, обновление CRISRFinder, включает портативную версию, улучшенную производительность и интегрированный поиск белков Cas. Рез. нуклеиновых кислот. 46 , W246–W251 (2018 г.).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 75.

    Vallenet, D. et al. MicroScope: интегрированная платформа для аннотации и исследования функций микробных генов с помощью сравнительного геномного, пангеномного и метаболического анализа. Рез. нуклеиновых кислот. 48 , Д579–Д589 (2020).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 76.

    Имам, С., Чен, З., Роос, Д. С. и Полшредер, М. Идентификация удивительно разнообразных пилей типа IV в широком диапазоне грамположительных бактерий. PLoS ONE 6 , e28919 (2011).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 77.

    Роулингс, Н. Д., Уоллер, М., Барретт, А. Дж. и Бейтман, А. MEROPS: база данных протеолитических ферментов, их субстратов и ингибиторов. Рез. нуклеиновых кислот. 42 , D503–D509 (2014).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 78.

    Янечек, М. и Крал, Р. Современная электронная микроскопия в физических науках и науках о жизни (InTech, 2016).

  • 79.

    Милобендзка А. и Мушинский А. Динамика популяций нитчатых бактерий, идентифицированных на польских полномасштабных очистных сооружениях с удалением питательных веществ. Науки о воде. Технол. 71 , 675–684 (2015).

    ПабМед Google Scholar

  • 80.

    Джо, С.Дж., Квон, Х., Чон, С.-Ю., Ли, К.-Х. и Ким, Т. Г. Сравнение микробных сообществ активного ила и мембранной биопленки в 10 полномасштабных мембранных биореакторах. Вода Res. 101 , 214–225 (2016).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 81.

    Stokholm-Bjerregaard, M. et al. Критическая оценка микроорганизмов, которые считаются важными для повышения биологического удаления фосфора в полномасштабных системах очистки сточных вод. Фронт. микробиол. 8 , 718 (2017).

    ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 82.

    Henriet, O., Meunier, C., Henry, P. & Mahillon, J. Нитевидное набухание, вызванное видами Thiothrix , эффективно контролируется на полномасштабных очистных сооружениях путем реализации стратегии уплотнения осадка. наук. 7 , 1430 (2017).

    ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 83.

    Чен, Ю.-Л. и другие. Деструкторы эстрогена и пути деградации эстрогена, выявленные в активном иле. Заяв. Окружающая среда. микробиол. 84 , e00001-18 (2018).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 84.

    Bolyen, E. et al. Воспроизводимая, интерактивная, масштабируемая и расширяемая наука о микробиомах с использованием QIIME 2. Nat. Биотехнолог. 37 , 852–857 (2019).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 85.

    Каллахан, Б.Дж. и др. DADA2: вывод образца с высоким разрешением на основе данных ампликона Illumina. Нац. Методы 13 , 581–583 (2016).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 86.

    McIlroy, S.J. et al. MiDAS: полевой справочник по микробам активного ила. База данных (Оксфорд) 2015 , bav062 (2015).

    Google Scholar

  • Функциональный анализ необычного пилуса IV типа у грамположительного Streptococcus sanguinis

        Бесплатная статья PMC.
    Высоко цитируемый. Обзор.
    Исключительно широко распространены наномашины, состоящие из пилинов типа IV: прокариотические швейцарские армейские ножи.
    Джейми-Ли Берри, Владимир Пеличич.
    FEMS Microbiol Rev, 21 марта 2015 г.; 39(1). PMID: 257
    Незначительная самосборка псевдопилина запускает удлинение псевдопилуса секреции II типа.
    Дэвид А. Сиснерос, Питер Дж. Бонд, +2 автора, Энтони П. Пагсли, Мануэль Кампос, Оливера Франсетик. менее
    EMBO J, 14 декабря 2011 г.; 31(4). PMID: 22157749    Бесплатная статья PMC.
    Систематический функциональный анализ показывает, что набор из семи генов участвует в тонкой настройке множественных функций, опосредованных пилями типа IV у Neisseria meningitidis.
    Дэниел Р. Браун, Софи Хелен, Этьен Карбонелле, Владимир Пеличич.
    Infect Immun, 5 мая 2010 г.; 78(7). PMID: 20439474    Бесплатная статья PMC.
    Генетическая трансформация Streptococcus sanguis. Одновременное изменение поверхностного распространения, компетентности, гемагглютинации и полярной фимбриации у выбранных штаммов.
    П. Гаустад, Л. О. Фрёхольм.
    Acta Pathol Microbiol Immunol Scand B, 1 декабря 1984 г .; 92(6).PMID: 6152366
    Идентификация различных белков архей с сигнальными пептидами класса III, расщепленными различными препилиновыми пептидазами архей.
    Залан Сабо, Адриана Оливейра Шталь, +3 автора, Соня-В. Альберс, Джессика С. Киссинджер, Арнольд Дж. М. Дриссен, Мехтильд Польшредер. меньше
    J Bacteriol, 23 ноября 2006 г .; 189(3). PMID: 17114255    Бесплатная статья PMC.
    Пили типа IV: e pluribus unum?
    Владимир Пеличич.
    Mol Microbiol, 11 апреля 2008 г .; 68(4). PMID: 18399938
    Часто цитируется. Обзор.
    Крупномасштабное исследование взаимодействий между белками, участвующими в биологии ворсинок типа IV у Neisseria meningitidis: характеристика подкомплекса, участвующего в сборке ворсинок.
    Микаэлла Джорджиаду, Марта Кастаньини, +2 автора, Гузель Каримова, Даниэль Ладан, Владимир Пеличич. меньше
    Mol Microbiol, 11 апреля 2012 г.; 84(5).PMID: 22486968
    Плотная геномная выборка выявляет пути пневмококковой рекомбинации.
    Клэр Чеваприча, Саймон Р. Харрис, +15 авторов, Николас Дж. Краучер, Клаудия Тернер, Пекка Марттинен, Лу Ченг, Альберто Пессия, Дэвид М. Ааненсен, Элисон Э. Мазер, Эндрю Дж. Пейдж, Сюзанна Дж. Солтер, Дэвид Харрис, Франсуа Ностен, Дэвид Голдблатт, Юкка Корандер, Джулиан Паркхилл, Пол Тернер, Стивен Д. Бентли. меньше
    Nat Genet, 11 февраля 2014 г .; 46(3).PMID: 24509479    Бесплатная статья PMC.
    Высоко цитируемый.
    Полногеномная идентификация основных генов Streptococcus sanguinis.
    Ping Xu, Xiuchun Ge, +10 авторов, Lei Chen, Xiaojing Wang, Yuetan Dou, Jerry Z Xu, Jenishkumar R Patel, Victoria Stone, My Trinh, Karra Evans, Todd Kitten, Danail Bonchev, Gregory A Buck. меньше
    научный представитель, 23 февраля 2012 г.; 1. PMID: 22355642    Бесплатная статья PMC.
    Нуклеотидная последовательность гена плазмиды Streptococcus faecalis, кодирующего 3’5″-аминогликозидфосфотрансферазу III типа.
    П. Триё-Куо, П. Курвален.
    Джин, 1 сентября 1983 г .; 23(3). PMID: 6313476
    Часто цитируется.
    Естественная компетенция рода Streptococcus: свидетельство того, что стрептококки могут изменять феротип путем межвидового рекомбинационного обмена.
    Л. С. Ховарштайн, Р. Хакенбек, П. Гаустад.
    J Bacteriol, 14 ноября 1997 г.; 179(21). PMID:
    04    Бесплатная статья PMC.
    Высоко цитируемый.
    Систематический генетический анализ Neisseria meningitidis определяет белки Pil, необходимые для сборки, функциональности, стабилизации и экспорта пилей типа IV.
    Этьен Карбонель, Софи Хелен, Ксавье Нассиф, Владимир Пеличич.
    Mol Microbiol, 14 сентября 2006 г.; 61(6). PMID: 16968224
    Пили IV типа у грамположительных бактерий.
    Стивен Мелвилл, Лиза Крейг.
    Microbiol Mol Biol Rev, 6 сентября 2013 г.; 77(3). PMID: 24006467    Бесплатная статья PMC.
    Высоко цитируемый. Обзор.
    Пилиновые белки типа IV: универсальные молекулярные модули.
    Кармен Л. Гилтнер, Илан Нгуен, Лори Л. Берроуз.
    Microbiol Mol Biol Rev, 4 декабря 2012 г.; 76(4). PMID: 23204365    Бесплатная статья PMC.
    Высоко цитируемый. Обзор.
    Идентификация детерминант вирулентности эндокардита у Streptococcus sanguinis с помощью мутагенеза с сигнатурными метками.
    Сехми Пайк, Лорен Сенти, +3 автора, Санкар Дас, Джоди Си Ноэ, Синди Л. Манро, Тодд Киттен. менее
    Infect Immun, 23 августа 2005 г.; 73(9).PMID: 16113327    Бесплатная статья PMC.
    Непосредственное наблюдение за разгибанием и ретракцией пилей IV типа.
    Дж. М. Скеркер, Х. К. Берг.
    Proc Natl Acad Sci USA, 2001 Jun 2007; 98(12). PMID: 11381130    Бесплатная статья PMC.
    Высоко цитируемый.
    Кристаллические структуры мотора ретракции пилуса PilT предполагают большие движения доменов и кооперацию субъединиц, управляющую подвижностью.
    Кеннет А. Сатишур, Грегори А. Ворзалла, +4 автора, Лоррейн С. Мейер, Эрин К. Хейнигер, Келли Г. Аукема, Ана М. Мисик, Катрина Т. Форест. меньше
    Структура, 16 марта 2007 г .; 15(3). PMID: 17355871    Бесплатная статья PMC.
    Генерация высокой силы является законсервированным свойством систем пилуса IV типа.
    Мартин Клаузен, Владимир Яковлевич, Лотте Сёгаард-Андерсен, Беренике Майер.
    J Bacteriol, 12 мая 2009 г.; 191(14).PMID: 111    Бесплатная статья PMC.
    MicroScope — интегрированный микробный ресурс для сбора и сравнительного анализа геномных и метаболических данных.
    Давид Валлене, Эжени Бельда, +13 авторов, Александра Кальто, Стефан Крювеллер, Стефан Энгелен, Орели Лажюс, Франсуа Ле Февр, Сирил Лонжен, Дэмиен Морнико, Дэвид Рош, Зоэ Руи, Грегори Сальвиньоль, Клод Скарпелли, Адам Александр Тил Смит, Марион Вейман, Клодин Медиг.меньше
    Nucleic Acids Res, 30 ноября 2012 г.; 41 (проблема с базой данных). PMID: 231
        Бесплатная статья PMC.
    Высоко цитируемый.
    Втягивание ворсинок способствует подергивающейся подвижности бактерий.
    А. Дж. Мерц, М. Со, М. П. Шитц.
    Природа, 19 сентября 2000 г .; 407 (6800). PMID: 109

    Часто цитируется.
    Геном условно-патогенного микроорганизма Streptococcus sanguinis.
    Пин Сюй, Жоао М. Алвес, +15 авторов, Тодд Киттен, Арунсри Браун, Чжэньмин Чен, Луис С. Одзаки, Патрисио Манке, Сючунь Ге, Мирна Г. Серрано, Даниэла Пуйу, Стефани Хендрикс, Инпин Ван, Майкл Д. Чаплин, Дорук Акан , Сехми Пайк, Даррелл Л. Петерсон, Фрэнсис Л. Макрина, Грегори Бак. меньше
    J Bacteriol, 2007 Feb 06; 189(8). PMID: 17277061    Бесплатная статья PMC.
    Высоко цитируемый.
    Белок платформы необходим для биогенеза пилуса типа IV.
    Херлиндер К. Тахар, Кевин Кемп, +2 автора, Мелисса Ким, П. Линн Хауэлл, Лори Л. Берроуз. менее
    J Biol Chem, 16 февраля 2013 г.; 288 (14). PMID: 23413032    Бесплатная статья PMC.
    Генетическая трансформация Streptococcus sanguis. Спонтанная и индуцированная компетентность отдельных штаммов.
    П. Гаустад, Дж. Эриксен, С. Д. Хенриксен.
    Acta Pathol Microbiol Scand B, 1 апреля 1979 г .; 87Б(2). PMID: 375670
    NeMeSys: биологический ресурс для сокращения разрыва между последовательностью и функцией человеческого патогена Neisseria meningitidis.
    Кристоф Русниок, Дэвид Валлене, +8 авторов, Стефани Флоке, Хелен Юлс, Корали Музе-Сулама, Даниэль Браун, Орели Лажюс, Кармен Букризер, Клодин Медиг, Филипп Глейзер, Владимир Пеличич. менее
    Genome Biol, 13 октября 2009 г .; 10(10). PMID: 19818133    Бесплатная статья PMC.
    Пили-зависимая скользящая подвижность IV типа у грамположительного патогена Clostridium perfringens и других клостридий.
    Джон Дж. Варга, Ван Нгуен, +3 автора, Дэвид К. О’Брайен, Кэтрин Роджерс, Ричард А. Уокер, Стивен Б. Мелвилл.меньше
    Mol Microbiol, 27 сентября 2006 г .; 62(3). PMID: 16999833
    Функциональный анализ генома Bifidobacterium breve UCC2003 показывает, что пили с плотным прилеганием (Tad) типа IVb являются важным и консервативным фактором колонизации хозяина.
    Мэри О’Коннелл Мазеруэй, Олдерт Зомер, +18 авторов, Шинейд С. Лихи, Юстус Реунанен, Франческа Боттачини, Маркус Дж. Клаессон, Фрэнсис О’Брайен, Кира Флинн, Патрик Дж. Кейси, Хосе Антонио Морено Муньос, Бреда Кирни, Эйлин М. Хьюстон, Кейтлин О’Махони, Дес Г. Хиггинс, Фергус Шанахан, Айри Палва, Виллем М. де Вос, Джеральд Ф. Фицджеральд, Марко Вентура, Пол В. О’Тул, Доуве ван Синдерен.меньше
    Proc Natl Acad Sci U S A, 2011 Jun 22; 108(27). PMID: 216    Бесплатная статья PMC.
    Высоко цитируемый.
    Совместная ретракция связанных пилей типа IV позволяет генерировать наноньютонную силу.
    Николя Биэ, Бенуа Ладу, +2 автора, Дастин Хигаси, Магдалина Со, Майкл Шитц. менее
    PLoS Biol, 18 апреля 2008 г.; 6(4). PMID: 18416602    Бесплатная статья PMC.
    Воронки типа IV опосредуют связывание ДНК во время естественной трансформации Streptococcus pneumoniae.
    Рафаэль Лоуренсо, Жерар Пео-Арноде, +8 авторов, Соня Бэконне, Жозеф Голт, Кристиан Малосс, Анник Дюжанкур, Натали Кампо, Джулия Шамо-Рук, Эрик Ле Кам, Жан-Пьер Клавери, Реми Фронзес. меньше
    PLoS Pathog, 05 июля 2013 г .; 9(6). PMID: 23825953    Бесплатная статья PMC.
    Подергивание моторики и наличие полярных фимбрий при распространении Streptococcus sanguis изолятов из горла человека.
    С. Д. Хенриксен, Дж. Хенриксен.
    Acta Pathol Microbiol Scand B, 1 апреля 1975 г .; 83(2). PMID: 1171576
    Инфекционный эндокардит.
    Йок-Ай Куэ, Филипп Морейон.
    Nat Rev Cardiol, 14 апреля 2011 г.; 8(6). PMID: 21487430
    Обзор.
    Адгезия к целлюлозе грамположительной бактерии Ruminococcus albus включает пили IV типа.
    Харивони Ракотоаривонина, Грегори Жюбелин, +3 автора, Мишель Эбро, Бриджит Гайяр-Мартини, Эвелин Форано, Паскаль Мозони. меньше
    Микробиология (Рединг), 11 июня 2002 г .; 148 (часть 6). PMID: 12055307
    Структура пилуса IV типа и бактериальная патогенность.
    Лиза Крейг, Майкл Э. Пике, Джон А. Тайнер.
    Nat Rev Microbiol, 22 апреля 2004 г.; 2(5). PMID: 15100690
    Часто цитируется. Обзор.
    Трансформация дергающихся штаммов Streptococcus sanguis.
    С. Д. Хенриксен, Дж. Эриксен.
    Acta Pathol Microbiol Scand B, 1 декабря 1976 г .; 84Б(6). PMID: 998260
    Характеристика компетентности и развития биопленки изолята Streptococcus sanguinis endocarditis.
    L Zhu, Y Zhang, +2 автора, J Fan, MC Herzberg, J Kreth. менее
    моль Oral Microbiol, 8 марта 2011 г .; 26(2). PMID: 21375702    Бесплатная статья PMC.
    Пили IV типа и подергивания подвижности.
    Джон С. Мэттик.
    Annu Rev Microbiol, 27 июля 2002 г .; 56. PMID: 12142488
    Часто цитируется. Обзор.
    Архитектура секреции II типа и механизма пилуса IV типа.
    Мелисса Эйерс, П. Линн Хауэлл, Лори Л. Берроуз.
    Future Microbiol, 21 августа 2010 г .; 5(8). PMID: 20722599
    Обзор.
    Периплазматические домены Pseudomonas aeruginosa PilN и PilO образуют устойчивый гетеродимерный комплекс.
    Л. М. Сампалеану, Дж. Б. Бонанно, +6 авторов, М. Айерс, Дж. Ку, С. Таммам, С. К. Берли, С. К. Алмо, Л. Л. Берроуз, П. Л. Хауэлл. менее
    J Mol Biol, 28 октября 2009 г .; 394(1). PMID: 19857646
    Поглощение ДНК во время бактериальной трансформации.
    Инес Чен, Давид Дубнау.
    Nat Rev Microbiol, 15 апреля 2004 г.; 2(3). PMID: 15083159
    Часто цитируется. Обзор.
    Система секреции II типа: волшебный бобовый стебель или белковый эскалатор.
    Мангаяркараси Ниваскумар, Оливера Франтич.
    Biochim Biophys Acta, 7 января 2014 г. ; 1843 (8). PMID: 24389250
    Часто цитируется. Обзор.
    Генетическая трансформация Streptococcus sanguis. Распределение компетентности и факторов компетентности в коллекции штаммов.
    П Гаустад.
    Acta Pathol Microbiol Scand B, 1 апреля 1979 г .; 87Б(2). PMID: 375671
    Структура и сборка внутренней мембранной платформы для инициации биогенеза пилуса IV типа.
    Виджайкумар Каруппиа, Ричард Ф. Коллинз, +2 автора, Анджела Тистлтуэйт, Я Гао, Джереми П. Деррик. меньше
    Proc Natl Acad Sci USA, 13 ноября 2013 г.; 110(48). PMID: 24218553    Бесплатная статья PMC.
    Моторные силы одиночных пилусов превышают 100 пН.
    Беренике Майер, Лаура Поттер, +3 автора, Магдалина Со, Синтия Д. Лонг, Хэнк С. Сейферт, Майкл П. Шитц. меньше
    Proc Natl Acad Sci USA, 26 ноября 2002 г. ; 99(25).PMID: 12446837    Бесплатная статья PMC.
    Высоко цитируемый.
    Поверхностные придатки архей: строение, функции, генетика и сборка.
    Кен Ф Джаррелл, Ян Дин, Дивья Б Наир, Сара Сиу.
    Life (Базель), 01 января 2013 г .; 3(1). PMID: 25371333    Бесплатная статья PMC.
    Обзор.

    Биомедицинский журнал научных и технических исследований

    2017 — 2022

    Текущий редактор(ы): Роберт Томас

    Из Biomedical Research Network+, LLC
    Библиографические данные для серий, поддерживаемых Анджелой Рой ().

    Доступ к статистике для этого журнала.
    Отслеживание цитирования всех элементов по RSS-каналу
    Чего-то не хватает в сериале или что-то не так? См. проверку данных RePEc для архива и серии.


    Том 36, выпуск 5, 2021

    Антагонистический эффект, который запрет на Twitter может оказать на профилактику заболеваний и психическое здоровье среднего нигерийского населения, стр. 28821-28822
    Отобо Д Даниэль , Окоро И Нгози и Месак Даниэль
    Функционализированные амином и кислотой наночастицы золота с помощью тиол-еновой химии кликов: биоортогональный путь поверхностной биоконъюгации Стр.28821-28826
    Пракаш Г. Кширсагар и Шив Шанкар Сангару
    Влияние запрета Твиттера на психомедицинскую и социально-экономическую жизнь молодых медицинских работников и стажеров в Нигерии, стр. 28827-28828
    Отобо Д Даниэль , Амамчукву Смех , Месак Даниэль , Эдугбе Э Адикпе , Танко О Халима , Иджи А Питер 907

    Альфред

    и

    Ослабление воспалительных цитокинов COVID-19 повышает выживаемость стр.28829-28834
    Венкатешварарао Ида и Боджибабу Чидипи
    Аудит и обзор лечения анкилозирующего спондилита в Катаре, стр. 28835-28840
    Абдул-Вахаб Аль-Аллаф и Юсеф М. Яхья
    Трансплантация аллогенной фекальной микробиоты при инфекции Clostridioides Difficile — серия случаев в Мексике, стр. 28840-28845
    Yolanda Lã³pez-Vidal , Ana Carmen Cuã © Ngel Guerra-Hernã ¡, Josã © Graciela , Graciela Cã ¡¡, Verã³nica à NGELES Morales , Патриция Ордес-± A , Samuel Ponce de Leã³n-rosales , Renã © arredondo-hernã ¡j , max j schmulson и ã ngel-mario zã ¡zrate
    Восемь признаков того, что вы заразились коронавирусом и не знали об этом стр.28848-28850
    Мохамед Бархуми
    Устройство для дезинфекции лицевых масок ультрафиолетовым светом стр. 28851-28856
    Мэрилин Дж. Прей Грант и Патрик А. Грант
    Влияние электроокисления на процесс удаления карбамазепина и ибупрофена из воды стр. 28857-28859
    Хуан Наполес-Армента
    Самообследование молочных желез и обращение за медицинской помощью женщин в городе Леку, регион Сидама, Южная Эфиопия, стр. 28860-28867
    Лалиса Гемечу Бона , Алему Толча Кереба и Дереже Гелета Негера
    Магнитно-резонансная ангиография затылочного канатика стр. 28875-28876
    Сатоши Ичиго , Хироши Такаги , Ичиро Кавабата , Казутоши Мацунами , Ацуши Имаи и Масаёси Теракура

    0
    Диффузионно-тензорная визуализация, полученная с помощью магнитно-резонансной томографии на основе гадолиния для диагностики пациентов с хронической болезнью почек Стр.28877-28883
    Лю Хэ , Ху Минчэн , Ли Хунъи , Гао Дань , Сунь Юаньбо и Тан Фэнцюн
    Оценка противоуролитиатического потенциала экстракта семян Moringa Oleifera, стр. 28889-28895
    Хина Али , Аиша Надим , Мария Анваар и Кайзер Джабин
    Этномедицинское использование различных растений для лечения астмы в Пакистане, стр. 28896-28902
    Мунзер Улла , Махин Канвал , Малиха Сарфраз , Хаят Улла и Мисба Улла Хан
    Уровень глюкозы в крови натощак и состояние питания у активных пожилых женщин, принимавших добавку с куркумином и овсяными отрубями, стр. 28903-28907
    LãAVIA VIVIANE Guimarã £ Es Couto , Jussara Cristina Alves Medeiros , Jã © Ssica Raquel de Santana , Sizys Valeska , Silva Silva , Paloma Katlheen Mora Melo , Marcãlia Ingrid Lima Barroso Нуньес , Кристиан Соуто Алмейда и Мария Ирани Нэкфусс
    Характер сна во время самоизоляции и пандемии COVID-19 — беспрецедентная стрессовая ситуация стр.28908-28910
    Сурья Пракаш Бхатт , Рандип Гулерия и Свати Аллен
    Влияние ацесульфама калия и сахарина на ангиогенез в анализе Cam, стр. 28928-28931
    Yunus Emre Ayhan , Samet Cirik , Osman Furkan Harmankaya , Omer Faruk dã¶nmez , Faruk yildiztekin , ELIF Aksu , Cihan Gãkdemir , Mehmet Hakan Ozma , Ахмет Хакан Йилмазер , Мехмет Гази Йилмаз , Давут Кендал , Эдип Айдан , Турция Медицинский факультет Университета Мармара , Бурак Арслан и 80879 Фарманли 2 1
    Инновационная оценка психопатологии в существующей криминологической психиатрии, стр. 28932-28939
    Саид Шоджа Шафти
    Нарушения полового развития (DSD): диагностический подход и лечение у младенцев и детей, стр. 28940-28950
    Ханан И.О. А.Л.Омран и Насир А.М. АЛДжурайян
    Развитие способности к подражанию в организационном поведении и психологии, стр. 28951-28956
    Фахри Эзсунгур
    Индекс толерантности для различных видов растущих деревьев в промышленном городе Джубайль, загрязненной зоне, Саудовская Аравия, стр.28957-28965
    Самех Амин , Амаль А Аль-Захрани , Абир С Меганид и Мона Х Эмам
    Осведомленность сообщества, восприятие, факторы и потенциальные препятствия для нефармацевтических вмешательств (НФВ) в связи с пандемией COVID-19 в штате Риверс, Нигерия, стр. 28984-28995
    Golden Oowhonda , Nnaana Oneekwere , Rogers B Kanee , Rogers B Kanee , Omosivie Madeka , Ifeoma Nwadiuto , Chinenye Okafor , Ojimah Chibianotu и Eric osamudiamwen Aigbogun
    Важные с медицинской точки зрения соединения в цветках трех высших растений: конопли, шафрана и эпифиллума oxypetalum Стр. 28996-29001
    Аюши Патель , Шрина Патель , Праваллика Санке , Шобха Потлакаяла и Сайрам Рудрабхатла

    Том 36, выпуск 4, 2021

    Синдром смирения среди детей, получивших травму. Краткий обзор результатов последних исследований, стр. 28656-28658
    Y Pigaiani и A Zocca
    Концентрация кетонов и глюкозы в крови на месте оказания медицинской помощи у доношенных здоровых новорожденных в первые 48 часов жизни — исследование POCK стр.28659-28663
    Шрадха Джоши , Асавари Канаде и Удай П Деваскар
    Интервенционный радиолог – Роль в лечении проблем доступа к сосудам у пациентов с хронической болезнью почек ХБП стр. 28664-28669
    Приянка Гупта , Панкадж Шарма и Удит Чаухан
    Долгосрочный уход, болезнь Альцгеймера и COVID-19 – Ситуационная схема, стр. 28670-28671
    Кармин Финелли
    Новая роль нейтрофилов в заживлении ран и восстановлении тканей — пути заживления стр. 28687-28688
    Раджив Кумар
    Лекарственно-индуцированная острая закрытоугольная глаукома – Повышение индекса подозрения стр. 28689-28696
    Джазли Тан Джиа Ан , Шейх Иззат Бин Зайнал-Абидин Бахаджадж , Фатима Латиф и Чжан Юань Хелен
    Оценка рифампицина при инфекции Trichinella Spiralis на мышиной экспериментальной модели в кишечной фазе, стр. 28697-28704
    Морено Гарсия Ма , Кирос Нуэз Z , Муаньос Морено Сай , Чавес Гуахардо Эг , Муаньос Эскобедо Jj и Мальдонадо 192 Мальдонадо
    Восстановительные возможности стоматологических порошков на основе композиции «Нанокремнезем Асил А-300 + травяные \ минеральные порошки» в профилактике или замедлении развития кариеса и стоматологических заболеваний Стр.28705-28714
    Д Старокадомский и М Решетник
    Недоедание и связанные с ним расстройства среди беременных женщин в Керанигондже, Бангладеш стр. 28715-28724
    Сайеда Закия Ханам и Хамида Ханум
    Профиль врожденных аномалий мочеполовой системы в двух учебных больницах в Энугу, Нигерия, стр. 28725-28729
    Чуквубукике Кевин Эмека и Озор Игнатиус Икемефуна
    Использование магнитотерапии при постлучевых язвах кожи — О случае Стр.28730-28732
    Хуан Карлос Альварес Родрагес , Алисия Тамайо Фигероа и Яснай Бакаллао Прадо
    Серозный рак яичников высокой степени, проявляющийся синдромом псевдо-Мейгса — отчет о болезни, стр. 28733-28737
    Филипа Феррейра да Силва , Энрике Набаис , Луас Каррейро , Инеш Ролим и Сара Белиао
    Рискованное поведение учащихся средней школы во Влёре, стр.28738-28745
    Майлинда Захай , Сидорела Сенка и Эмирйона Кишай
    Соображения по использованию медицинского каннабиса – обзор пользы и вреда стр. 28746-28753
    Дхана Ратна Шакья , Сандеш Упадхая , Хари Неупане и Рошан Субеди
    ILRs – Имплантируемые петлевые регистраторы, руководство по установке и меры предосторожности после ухода – обзор и отражение литературы и нашего опыта стр.28754-28760
    Кэтлин Фазинг и Сюзанна Бенлусиф
    Полуавтоматическая маркировка кистозного макулярного отека при ОКТ-сканировании стр. 28761-28767
    Люк Гринвуд , Башир Аль Дири и Магед Хабиб
    Регуляторные роли миР-126 в воспалительном ответе и запрограммированной гибели сердечных миоцитов, вызванных ацидозом во время имитации ишемии, стр. 28768-28776
    Цзиньсюэ Лю , Дингли Сюй , Цюаньхуань Чжан , Эйлин Вэй , Кит А.Webster , Gaoxing Zhang , Anjian Song , Wenfeng Tan , Weidong Gao , Wei Zhou и Jianqin Wei
    Влияние антистрессовых препаратов и витаминов на рост, развитие и продуктивность фазанов стр. 28785-28787
    Шафига Топчиева , Рамиз Мадатов и Ламия Йылдыз
    Гендерное неравенство и роль женщин в сельском хозяйстве на юго-востоке Нигерии, стр.28788-28792
    Udemezue Jc и Odia Fn
    Антигипертензивные характеристики сакубитрила валсартана стр. 28793-28795
    Сай Яо Цин , Лу Шэн Юй и Цао Бан Мин
    Роботизированная терапия реабилитации голеностопного сустава, мини-обзор, стр. 28796-28797
    Ашкан Джаханьяни , Сейед Али Хоссин Захраи , Саид Карими Матлуб и Расул Карими Матлуб
    Исследование молекулярной докинга Chlamydia Trachomatis с использованием салицилиденацилгидразидов в качестве ингибиторов Стр.28798-28811
    Эммануэль Исраэль Эдаке , Адаму Узаиру , Пол Эндрю Мамза и Гидеон Адаму Шаллангва
    Почему гипертоники сегодня считаются группой риска по COVID-19? стр. 28812-28814
    Хуан Вэй Лин
    COVID-19 и хронические неинфекционные заболевания стр. 28815-28816
    Хуан Карлос Мирабаль Рекена и Белкис Альварес Эскобар
    Испытание средиземноморской диеты на здоровье, долголетие и профилактику хронических сердечно-сосудистых заболеваний — предварительное объявление стр.28819-28820
    N Angelide , B Balas , S NOVO , J Fernandes , L Antignandi , E HUSSEIN , P CH Liapis , P POREOS и E Andreou

    Том 36, выпуск 3, 2021

    Комплексная идентификация узловых генов и сигнальных путей для миелодиспластического синдрома с помощью биоинформатического анализа, стр. 28453-28462
    Мэнъи Чжан и Биньхан Го
    Рыбная фауна реки Сева, важного гималайского притока реки Рави, в округе Катуа союзной территории штата Джамму и Кашмир, Индия, стр. 28474-28476
    Gupta Sc и Dutta Sps
    О влиянии переменного электромагнитного поля на движение эритроцитов в системе кровообращения стр. 28477-28479
    Гладков Т.О.
    Респираторные проявления при COVID-19 и «длительном Covid» — заболеваемость, осложнения и последствия, стр. 28480-28494
    Винод Нихра
    Непальпируемые образования молочной железы – диагностика и лечение стр.28495-28502
    Мариан Бакоан , Томаня Янкович , Андрей Вондрак и Наталья Фарраова
    Заключение договоров в сфере здравоохранения стр. 28503-28507
    Абас Хан и Мохд Сарвар Мир
    Гаванский синдром Возможная причина стр. 28508-28510
    Пол Т.Е. Кьюсак
    Метаболические нарушения при клещевом энцефалите: мини-обзор стр.28511-28513
    Хуэй Сун , Лу Дэ Шэн , Хай Цзюнь Чжэн , И Цин Ню , Ян Дан Ду и Чжи Хуэй Ми
    Дозовые характеристики радиационно-индуцированного рака щитовидной железы I-131 стр. 28514-28519
    Стояров Ан и Хрусталев Вв
    Влияние межкапельного зазора на выход хлопьев амаранта стр. 28520-28523
    Кандроков Роман Хажсетович
    Комбинированная проточная цитометрия и молекулярный мониторинг рецидива центральной нервной системы у пациента с FLT3-ITD и NPM1-положительным ОМЛ Стр.28524-28527
    Metafuni Elisabetta , Bellesi Silvia , Giammarco Sabrina , Rossi Monica , Bacigalupo Andrea , Minnella Gessica , Sorã Federica , Laurenti Luca , Balducci Mario , Sica Simona и Кьюзоло Патриция
    Имитация лазерной абляции модельного глаза позволяет пациенту просмотреть свое зрение перед проведением ЛАСИК стр.28528-28538
    Рафаэль Л. Васкес
    Проверка концепции для изучения связи между аутовакцинами и заболеваемостью COVID-19 у пациентов с рецидивирующими респираторными заболеваниями, стр. 28539-28542
    Jaime Leache Pueyo , Laura Pã © Rez delgado , josãez , , Raquel artal ,
    Распространенность и связанные аномалии при гастрошизисе и омфалоцеле в Вилья-Клара, Куба: 30-летняя серия с 1990 по 2019 гг., стр.28543-28551
    Noel Taboada Lugo , Ana E Algora Hernã endez , Manuela Herrera Martãnez , Andre Torre , Oriali Piedra Morraees и Electer Anoceto Armiã ana
    Устройство и метод измерения объема в сосудах для хранения вина стр. 28573-28578
    Л Кастанеда
    Распространенность синдрома выгорания у студентов-медиков из университетского учреждения Картахены стр.28579-28583
    Ингрид Гонсалес Артета
    Алкалоиды, выделенные из Ephedra Alata — Характеристика и защитные эффекты против индуцированных цисплатином поражений печени и почек у мышей, стр. 28591-28602
    Файруз Сиуд , Фадва Шаабене , Аида Ламер , Лейла Чекир Гедира , Свен Мангелинкс и Эли Боннер

    0
    Тупая травма печени у педиатрического пациента Стр. 28603-28607
    Leganã © S Villanueva Carlos , Federica Bianchi , Brun Lozano Nuria , Goruppi Iilia , Brio Sanagusti Sonia , Coca Fernandez Elisabeth и Boronat Guerrero Susana
    Touch Методы сбора ДНК для непористых поверхностей с использованием ватных и нейлоновых тампонов стр. 28608-28612
    Салем К. Алкетби и Гудвин В
    E Health и M health – Будущее здравоохранения стр.28613-28615
    Абас Хан и Мохаммед Сарвар Мир
    Лечение и последующее наблюдение за зубами с апикальным поражением после осложненного перелома коронки стр. 28616-28620
    Bilge Ozcan и Bade Sonat
    Клинические эффекты эпидуральной анестезии лидокаином в сочетании с низкими дозами ропивакаина при плановом кесаревом сечении стр. 28621-28626
    Хуэйцзюнь Ван , Инь Бао и Цзюнь Сюн
    Полиморфизм генов ренин-ангиотензин-альдостероновой системы и острая сердечная недостаточность Стр. 28627-28634
    Трабелси Имэн , Tounsi Nejia , Msolli Магомет Амин , Sekma Адель , Грисса Мохаммед Хабиб , Beltaief Kaouthar , Буиды Вахид , Boubaker Хамди , Boukadida Лютфи , Boukef Риад , Слиман Мохаммед Насер и Нуира Семир
    Культивируемые бактериальные симбионты морской губки с биологической активностью Стр.28635-28646
    Атира Кришнан Ка и Кирти Тр
    Предварительная инкубация плазмы с папаином перед анализом предполагает, что реакция Гелла и Кумбса типа II была продемонстрирована тестом ингибирования адгезии лейкоцитов стр. 28647-28655
    Селсо Эдуардо Оливье , Режане Патусси душ Сантуш Лима , Дайана Гуэдес Пинту и Ракель Акация Перейра Гонасальвеш душ Сантуш

    Том 36, выпуск 2, 2021

    Ультразвуковое исследование легких у пациента с Covid, получавшего лечение тоцилизумабом — история болезни стр. 28270-28275
    Калабрия G , Каталано М , Парадизо L , Лиорре Г , Сконьямильо У , Фарелла Н и Либерти А 9184 9084
    Anti-TNFa – индуцированная демиелинизация у пациента с ревматоидным артритом стр. 28276-28278
    Агата Вальчак
    Проблемы, с которыми сталкиваются пациенты на диализном лечении в эпоху COVID-19, и возможные решения Стр.28279-28282
    Sajid IQBAL , acimen iqbilla , Keron Akintola , Keron Akintola Ayodele Blaire , Behzad Saeed Gill , Fesih Muhammad Waseem , UMAIR SEAED MAHMUD , MUHAMMAD JAHANZAIB KHAN , ABDullah Ali , Mahnoor Aitzaz Khan , Мухаммед Muneeb Arshad , Anjli Tara , Tetiana Medvid , Tetiana Medvid , Muhammad Bilal Ahmed , Erjola Bidika , Meklit Zenbabaw Hunde , Khadija Nasim и Nadeem IQBAL
    Обзор потенциальных клиентов, продвигающих стратегии лечения апоптоза и рака, стр. 28283-28290
    Абиная Рамеш , Сумика Госал , Деваки Муралидхаран , В Дипа Парвати и Арун Дхармараджан
    Неонатальный сепсис в Нигерии 1 — Вводный обзор, стр. 28291-28297
    Ogbara Cn , Chime He и Nwose Eu
    Неонатальный сепсис в Нигерии 2 — Описательный обзор эпидемиологии и социально-экономических факторов, стр.28298-28303
    Ogbara Cn , Chime He и Nwose Eu
    Неонатальный сепсис в Нигерии 2 — Описательный обзор эпидемиологии и социально-экономических факторов, стр. 28304-28310
    Ogbara Cn , Chime He и Nwose Eu
    Механизмы биохимической и молекулярной резистентности к дихлордифенилтрихлорэтану (ДДТ) и некоторым пиретроидным инсектицидам у переносчиков вируса Западного Нила, Culex Pipiens, стр.28311-28317
    Мохаммад Али Ошаги , Мохамад Реза Абай , Ясер Салим Абади , Хасан Ватандуст , Ахмад Али Энаяти и Мохаммад Амин Горухи 4
    Ницше и большое здоровье. Искусство как терапия культурой стр. 28318-28319
    Адилсон Фелисио Фейлер
    Проспективное исследование по оценке аудиологических результатов тимпанопластики с помощью аутологичной плазмы, обогащенной тромбоцитами Стр.28320-28323
    Лодыжка № , Раджеш Радхакришна Хавалдар , Света Синха и Виджай Ерамалла
    Конъюгация кератиноцитов пептидом адгезии индуцирует повышающую регуляцию белков с плотным соединением и иммунную регуляцию при воспалительных состояниях стр. 28324-28334
    Jun-Ho Lee , Nam Chul Jung , Jie Young , , , Ji SOO OH , Ji Hyung Chung , HAN GEUK SEO , Дэ-Сог Лим и Джинджунг Чой
    Полная АВБ, изначально осложняющая ИМпST после чрескожной реваскуляризации — клинический случай стр.28335-28340
    Larsen Clarck Moumpala Zingoula , Rachida Nhiri , Mohamed Bensasser , Hassan Fadoum , Фатима Zahra Benmessaoud , Latifa Oukerraj , Ibtissan Fullat и Mohamed Cherti
    Тайцзи, цигун и лечение депрессии и тревоги стр. 28350-28353
    Роберт МакГи
    Распространенность туберкулеза с множественной лекарственной устойчивостью в Йемене и факторы, влияющие на него, в 2014 г. стр.28355-28360
    Харун Ахмад Табит и Азми Мохаммед Тамил
    Определение индекса стресса после длительной ходьбы и 4 чашек растворимого кофе у взрослого мужчины стр. 28355-28356
    Иван Домущев
    Насилие на рабочем месте в медицинском учреждении стр. 28361-28362
    Kaleab Tesfaye Tegegne , Andualem Zenebe , Abiyu Ayalew Assefa , Eleni Tesfaye Tegegne , Mekibib Kassa Tessema и WOOSYELELEHELELEH SEMEON BAGAJJO
    Расширение клинического использования ингибиторов контрольных точек для лечения рака требует разработки прогностических моделей пневмонита, индуцированного иммунотерапией Стр.28363-28365
    Ивайло Б Михайлов , Кристофер Монтойя и Бенджамин Шпилер
    Оценка безопасности богатых тритерпеноидами экстрактов, полученных из Poria Cocos, стр. 28363-28371
    Летиция Б Си , Ли-Кинг Ян , Чиа-Вэнь Тен , Вэнь-Мейн Ву и Чунг-Тян Лян
    Обзор благосостояния и ухудшения состояния окружающей среды — социологическая оценка, стр.28372-28376
    Мохаммад Таги Шейхи
    Профили стратегии темпа элитных спортсменок в спортивной ходьбе на 20 км, стр. 28377-28380
    Fitili Pi и Giovanis Vf
    Трехмерный анализ конечных элементов свободной реконструкции малоберцового лоскута дефектов нижней челюсти стр. 28381-28386
    Y Sun , Y Guo , J Li , D Yang и K Hu
    Виртуальное медицинское образование в эпоху COVID-19 и внедрение проблемно-ориентированного обучения и обучения на основе конкретных случаев — Восприятие студентов-медиков стр.28387-28390
    Зайнаб Атия Дахил
    Преимущества раннего послеоперационного кардиохирургического лечения стр. 28391-28396
    Энджи Мишель Мэй Джио Ле , Налли Лугелия Цель Кантун Ле , Элоиза Беатрис дель Сокорро Пуч Ку МакЭ и Лаура Дионе Ортос Гомес
    Роль микоризных путей в поглощении фосфора и цинка растениями стр. 28397-28411
    Parashuram Bhantana , Мухаммад Shoaib Rana , Cheng-Xiao Hu , SHREE Prasad Vista , Razan Malla , Bishnu Das Joshi и Govinda Prasad Timsina
    Выделение и оценка видов Candida и связанных с ними микробов, вызывающих инфекции желудочно-кишечного тракта, среди пациентов, обращающихся за медицинской помощью в третичном медицинском учреждении в Лагосе, юго-запад Нигерии стр.28423-28432
    Дамола Энтони Банделе , Удех Укачи Нненна , Адеошун Олувабукола Виктория и Бакарей Аделей Соломон
    Пренатальное выявление полного дефекта атриовентрикулярной перегородки — отчет о синдроме Дауна — Клайнфельтера из Вьетнама, стр. 28433-28437
    HOA THI PHUONG BUI , Lien Thi Ha , Huong Thi Thu Han , Quy Van Hoang , Ha Thi Thanh Ly , HUNG VAN NGUEN , Nhung Phuong Dinh , Huyen Thi Thi Тран , Хуонг Тхи Тхань Тран , Ту Нгок Нгуен и Хинь Дык Нгуен
    Распространенность артериальной гипертензии среди врачей и факторы риска в больнице Аль-Таура, Сана, в 2019 г. стр.28438-28448
    Харун Ахмад Табит и Мохаммед Ахмед Абдулла
    Эндоваскулярное лечение инсульта у пациентов, перенесших COVID-19, стр. 28449-28452
    Слободан Чулафик , Александра Милошевич , Саша Вириевич Йованович , Драгана Петрович Попович , Марко Прокич и Александра Бибич

    Том 36, выпуск 1, 2021

    Влияние условий матери на здоровье питания детей в Индии, стр.28115-28120
    Бита Афшариния , Анджула Гуртоо , Анант Арора и Винай Кумар С
    Пространственное планирование и устойчивое развитие стр. 28122-28123
    Сергей Митягин
    Как нарушение слуха влияет на двигательную активность? стр. 28124-28128
    M Bonis и K Тиллери
    Редкая транслокация De Novo Robertsonian 45, XX, rob (13;13) (q10; q10) Носитель кариотипа у нормальной женщины; Но повторяющиеся аборты стр.28129-28132
    Серап Тутгун Онрат , Мухсин Эльмас и Камуран Авча ±
    Капошиформная гемангиоэндотелиома и феномен Казабаха-Мерритта — эффективность винкристина в сочетании со стероидами стр. 28133-28136
    Beatriz Semer , Mariana Balthazar Nogueira Passos , Nathalia Gioia de Paula , Rauã andrã © Natanabe , Natalabe , Natalia Brenneken Duarte Ambar , Rodrigo Regacini и Eliana Maria Monteiro Caran
    Агрессивная резекция перихилярной холангиокарциномы — отчет о болезни и обзор литературы стр.28137-28141
    Цзицзюнь Шань , Чансянь Ли и Сянчэн Ли
    Разработка модуля здорового образа жизни для улучшения психического здоровья учащихся-подростков — протокол рандомизированного контролируемого исследования, стр. 28145-28153
    Эсра Таджик , Насрин Омидвар , Мохаммадреза Мохаммади и Бехнам Рашидхани
    Варианты Covid-19 в Марокко стр. 28154-28156
    Рашид Айт Адди , Мохамед Шеркауи и Абдельхафид Бенксим
    Программа двойного диплома (PharmD/MPH или PharmD/MBA) и опрос мнений студентов-фармацевтов, стр.28157-28161
    Мерси Ньямор , Келечи Калу , Мишель Гакпара и Бисрат Хайлемескель
    Онлайн-обучение студентов и мнения студентов о его влиянии на обучение, стр. 28162-28166
    Девен Принц , Селеста Чепмен , Кабри Харрис и Бисрат Хайлемескель
    Опасения по поводу трудоустройства после окончания учебы — опрос студентов-первокурсников аптеки стр.28162-28165
    Дженнифер Оби , Эванна Браун , Essence Bell и Бисрат Хайлемескель
    Влияние виртуального обучения в аптечной программе, стр. 28167-28171
    Мишель Брукс , Оливер Нимох , Натаниэль Оппонг и Бисрат Хайлемескель
    Измерение параметров вариабельности частоты пульса (тест покоя, ортостатический тест, метрономный дыхательный тест) после приема 1 и 3 чашек растворимого кофе у мужчины 60 лет Стр.28172-28173
    Иван Домущев
    Микрожидкостные бумажные аналитические устройства (ÎœPADS) в современном анализе стр. 28174-28176
    Хоббс Бауэр Реанг , Гагандип и Рохит Бхатия
    Микрожидкостные устройства на основе нити/шнура в современном анализе, стр. 28177-28179
    Дипак Шах и Рохит Бхатия
    Клиническая картина пациентов, находящихся на программе хронического гемодиализа, стр.28180-28182
    Таня Больевич и Дамир Пеличич
    Молодежная трансформация с акцентом на Азию — социологическая оценка стр. 28183-28190
    Мохаммад Таги Шейхи
    Использование нового малого пептида, KTH-222, в лечении рака поджелудочной железы человека — оценка различных схем лечения с использованием модели ксенотрансплантата мыши, стр. 28191-28197
    Майкл Р. Козловски и Рони Э. Козловски
    Крысиная лихорадка — обзор истории болезни, стр.28198-28212
    Мари Коссенс и Эммануэль Де Лаэр
    Опросник переживания одиночества стр. 28213-28223
    Манакова Е.А.
    Аутосомно-доминантные мутации STAT1 с приобретением функции при бронхоэктазах и сахарном диабете, стр. 28224-28227
    Нин Сюй , Чжуанбо Луо , Фанг Лю и Юефэн Е
    О методике определения расхода пружин при изменении их положительного напора Стр.28228-28230
    Алоян Нг
    Микропровода со стеклянным покрытием для композитов стр. 28231-28237
    Сергей А Баранов
    Katuki Picrorhiza Kurroa — многообещающая аюрведическая трава, стр. 28238-28242
    Дикша Райна , Сумит Райна и Браджешвар Сингх
    Неоадъювантная химиотерапия при раке молочной железы — реальная практика с многопрофильной командой в Южном Китае, стр. 28243-28252
    Fang Chen , Lingyu Ma , Fan Yi , Manling Zhou , LIAY LIU , LIN SHEN , Haiman Jing , KA на LAM , Jian Shi , Эми Чанг и Хао Юй
    Фактор риска ургентного и ургентного недержания мочи De Novo после перевязки аутологичной фасции лонно-влагалищного стр. 28253-28257
    Пей Шань Ян , София Дельпе , Кейси Г Ковалик , В Стюарт Рейнольдс , Мелисса Р Кауфман и Роджер Р Дмоховски 0 0
    Сила и мудрость предотвращения.Сердечно-сосудистый риск, новая проблема и подход к ЛЖВ стр. 28258-28267
    Рикардо Массманн , Лукаш Флейшханс , Давид Джилич , Марек Малый и Ладислав Мачала
    Непрерывная поддержка пожилых собак стр. 28268-28269
    Рональд Лаго , Тейлор Рэй Шрайбер и Меган Сланина

    Обновление журнала «Туберкулез 2005» | Американский журнал респираторной и интенсивной терапии

    ПАТОГЕНЕЗ И ИММУНИТЕТ ТУБЕРКУЛЕЗА

    Раздел:

    ChooseВерх страницы ПАТОГЕНЕЗ И ИММУНИТЕТ. .. <<ЭПИДЕМИОЛОГИЯ ТУБЕРКУЛО... ДИАГНОСТИКА ТУБЕРКУЛЕЗА... ЛЕЧЕНИЕ ТУБЕРКУЛЕЗА Ссылки СО ССЫЛКАМИ НА СТАТЬИ

    Среди зарегистрированных геномных изменений Mycobacterium tuberculosis существенный интерес представляют изменения, связанные с геном фосфолипазы С (1, 2). Таларико и его коллеги опубликовали более раннее исследование генетического разнообразия четырех генов M. tuberculosis , кодирующих фосфолипазу C ( plcA , plcB , plcC и plcD ), в результате и вставок

    9 IS06. ассоциированные делеции среди 106 клинических изолятов из Турции (3).Сорок (38%) изолятов показали прерывания гена plcD . Доля изолятов с прерываниями в plcA , plcB и plcC составила 3,8, 1,9 и 3,8% соответственно. Эти данные могут указывать на вероятно большее значение гена plcD по сравнению с другими компонентами, кодирующими фосфолипазу С.

    Yang и его коллеги дополнительно рассмотрели значимость мутаций микобактериального гена фосфолипазы C D (plcD) в клинических проявлениях туберкулеза путем интеграции сравнительного геномного анализа и эпидемиологического анализа данных (4). Среди 496 хорошо охарактеризованных клинических изолятов M.tuberculosis 147 (30%) были обнаружены с региональными прерываниями (вставки или вставки + делеции) гена. Пациенты, инфицированные мутантными типами plcD , в два раза чаще имели экстраторакальное заболевание, чем инфицированные дикими типами (скорректированное отношение шансов [OR], 2,19; p = 0,005). Грудной туберкулез был определен как заболевание, ограниченное легкими, плеврой и внутригрудными лимфатическими узлами, тогда как пациенты с внегрудным заболеванием относились к тем, у кого было только внегрудное поражение, а также к пациентам с сопутствующим торакальным заболеванием.Когда анализ был ограничен 275 изолятами с различными образцами отпечатков ДНК, все еще наблюдалась та же ассоциация (скорректированное ОШ, 2,74; р = 0,005). Дальнейший анализ с разбивкой внелегочного туберкулеза на три категории показал сильную связь мутаций plcD с изолированным поражением внелегочных органов (скорректированное ОШ, 3,17; 95% доверительный интервал [ДИ], 1,36–7,38), предельную связь с диссеминированным заболеванием (скорректированное ОШ, 1,88; 95% ДИ, 0,91-3,90) и отсутствие связи с экстраторакальным лимфаденитом (скорректированное ОШ, 1. 46; 95% ДИ, 0,35–6,13). Одним из недостатков исследования было отсутствие информации о ВИЧ-статусе примерно у половины пациентов, но при многомерном анализе не было обнаружено связи наличия ВИЧ-статуса с экстраторакальным туберкулезом. Таким образом, результаты Yang и соавт. позволяют предположить, что ген plcD M. tuberculosis может потенциально участвовать в патогенезе туберкулеза, что приводит к вариациям его клинических проявлений (4). Хотя причинно-следственная связь не может быть доказана, исследование представляет ценность для дальнейшего поиска возможных генных мишеней для функциональных исследований в надежде идентифицировать M.туберкулез факторы вирулентности.

    Образование гранулемы и образование полостей являются ключевыми явлениями в патогенезе туберкулеза. Первый в значительной степени представляет собой механизм сдерживания болезни, тогда как последний способствует передаче M. tuberculosis, и, возможно, способствует персистенции бациллярных бактерий. Было обнаружено, что синтетический ингибитор матриксной металлопротеиназы способствует образованию гранулемы на ранней стадии легочной инфекции M.tuberculosis на мышиной модели (5).Что касается кавитации, Элкингтон и его коллеги исследовали экспрессию генов матриксных металлопротеиназ (ММП), семейств дезинтегринов и металлопротеиназ, а также тканевых ингибиторов металлопротеиназ в инфицированных M. tuberculosis макрофагах человека с помощью обратной транскриптазы-полимеразной цепной реакции в реальном времени ( обратная транскриптаза – ПЦР) (6). Секрецию ММР также измеряли с помощью зимографии и вестерн-блоттинга, а экспрессию в биоптатах тканей пациентов с туберкулезом легких определяли с помощью иммуногистохимии.Было показано, что экспрессия генов и секреция MMP-1 и MMP-7 сильно активируются M.tuberculosis , без сопутствующего увеличения количества тканевых ингибиторов металлопротеиназ для противодействия их активности. Было обнаружено, что дексаметазон подавляет ММР-1, но не ММР-7, экспрессию и секрецию генов. В биоптатах, взятых у больных туберкулезом, показано, что макрофаги экспрессируют ММП-1 и ММП-7, примыкающие к участкам деструкции тканей. Таким образом, экспрессия и секреция ММП-1, но не ММП-7, составляют относительно М.tuberculosis –специфический и простагландинзависимый. Напротив, было обнаружено, что вакцина M. bovis– бацилла Кальметта-Герена (БЦЖ) увеличивает экспрессию и секрецию гена MMP-7 так же, как M. tuberculosis , но не повышает регуляцию MMP-1. Вместе с доказательствами, отражающими возможную связь ММП-1 с разрушением легких при других заболеваниях, таких как эмфизема, эти данные позволяют предположить, что повышенная экспрессия ММП-1 в макрофагах, инфицированных M.tuberculosis , может быть ключевым этапом в формировании легочных полостей.Модуляция чрезмерной активности MMP-1 может представлять собой потенциальную терапевтическую мишень для улучшения иммунопатологии туберкулеза. Влияние взаимодействия между инфекцией M. tuberculosis и цитокинами хозяина на экспрессию MMP также может быть потенциально интересной областью для дальнейшего изучения (7).

    После инокуляции M.tuberculosis через аэрозольные капельные ядра альвеолярные макрофаги и CD4 и CD8 Т-клетки взаимодействуют в сдерживании микроба и иммунопатогенезе туберкулеза.Существует общее мнение, что Т-клетки CD4 играют ключевую роль в защитном иммунитете против M.tuberculosis. CD8 + Т-клетки играют важную роль в качестве клеток-киллеров M.tuberculosis– инфицированных мишеней, лизируя инфицированные бациллами макрофаги посредством Fas-независимого пути экзоцитоза гранул. Затем взаимодействие Fas-FasL приводит к апоптотической гибели клеток-мишеней, инфицированных M.tuberculosis . Периферические CD8 человека + Т-клетки показывают М.tuberculosis и распознают микобактериальные антигены, такие как ранний секреторный антиген-мишень 6-KDa (ESAT-6), и способствуют выработке IFN-γ и фактора некроза опухоли α при стимуляции M.tuberculosis.

    Carranza et al. изучили контроль роста M. tuberculosis с помощью альвеолярных макрофагов и аутологичных Т-клеток CD4 + и CD8 + крови у здоровых лиц, контактировавших с домохозяйствами, и у здоровых не подвергавшихся воздействию контрольных субъектов (8). Было обнаружено, что CD8 + Т-клетки от здоровых бытовых контактов значительно усиливали контроль бациллярного роста аутологичными альвеолярными макрофагами. В неэкспонированных контактах с населением не наблюдалось заметного вклада Т-клеток CD8 + в контроль роста. Кроме того, ни в одной из двух исследованных групп не было обнаружено, что CD4 + Т-клетки усиливают контроль роста бактерий. Однако не было обнаружено корреляции между концентрациями IFN-γ и оксида азота и контролем роста М.tuberculosis , вызываемый альвеолярными макрофагами и CD8 + Т-клетками. Таким образом, возможно, что циркулирующие M. tuberculosis -специфические CD8 + эффекторные Т-клетки хозяина могут системно размножаться после бактериального воздействия, и что рекрутирование этих M. tuberculosis -специфических CD8 + Т-клеток из крови в локальные очаги воспаления в легких могут играть важную роль в борьбе с первичной инфекцией. Эти результаты могут дать полезную информацию, касающуюся разработки вакцин и других иммунотерапевтических стратегий.

    Рой и его коллеги продемонстрировали, что лечение мышей, инфицированных M.tuberculosis , однократным введением высоких доз внутривенного иммуноглобулина привело к существенному снижению бациллярной нагрузки в селезенке и легких (9). Иммуноглобулин не оказывал ингибирующего действия на рост M.tuberculosis в мышиных макрофагах костного мозга. Однако анализ Т-клеток, инфильтрирующих легкие, выявил небольшое увеличение количества CD8 + , но не CD4 + Т-клеток у мышей, получавших высокие дозы внутривенного иммуноглобулина.

    Ирвин и его коллеги провели исследование по отслеживанию антиген-специфических CD8 + Т-клеток в легких мышей, иммунизированных противотуберкулезной вакциной-кандидатом Mtb72F (10). Они показали, что CD8 + Т-клетки, распознающие иммунодоминантный Mtb32-специфический эпитоп, могут быть обнаружены в значительном количестве в ходе инфекции у мышей, подвергшихся воздействию низких доз аэрозоля M. tuberculosis , и что предшествующая вакцинация значительно увеличила количество этих клеток в ранние моменты времени в легких.Эффекторные клетки демонстрировались секрецией IFN-γ, и очень немногие из них содержали гранзим B. Однако по мере прогрессирования инфекции многие активированные CD8 + Т-клетки подавляли экспрессию CD45RB и повышали экспрессию интерлейкина. -7 (ИЛ-7) α-цепи рецептора, что свидетельствует об их переходе в состояние памяти. Эти результаты подтверждают гипотезу о том, что M.tuberculosis -специфические CD8 + Т-клетки могут быть нацелены на вакцинацию полипротеином Mtb72F.

    Становится все более очевидным, что в защитный иммунитет против туберкулеза вовлечен некий дополнительный механизм, помимо выработки цитокинов хелперных Т-клеток типа 1 (Th2), таких как IL-12, IFN-γ и фактор некроза опухоли α. Похоже, что иммунитет, опосредованный реакцией Th2, будет эффективен только в отсутствие другого подрывного или разрушительного влияния, такого как реакция Th3 с участием IL-4 (11). Слабое понимание роли продукции ИЛ-4 при туберкулезе связано с невозможностью более ранних исследований провести различие между агонистом ИЛ-4 и его сплайс-вариантом ИЛ-4δ2, что привело к получению данных, которые было трудно интерпретировать.Dheda и соавт. недавно провели соответствующие исследования in vivo и in vitro IL-4δ2 при туберкулезе легких (12). Их цель состояла в том, чтобы оценить уровни матричной РНК (мРНК), кодирующей ИЛ-4 и ИЛ-4δ2, и их связь с клиническими и лечебными параметрами в клетках из лаважа легких и крови больных туберкулезом легких. Уровни IL-4δ2, IL-4, IFN-γ и растворимого CD30 измеряли с помощью ПЦР и соответствующих иммунологических анализов у ​​29 пациентов с туберкулезом и соответствующих контрольных субъектов, у которых отсутствовал ответ на M.tuberculosis –специфические антигены. Уровни мРНК ИЛ-4 и ИЛ-4δ2 были повышены в нестимулированных клетках из бронхоальвеолярного лаважа и крови больных туберкулезом по сравнению с контрольными субъектами (p < 0,005). У контрольных субъектов были низкие базальные уровни мРНК IL-4 и IL-4δ2, экспрессируемые в основном не-Т-клетками (p < 0,05). У пациентов были более высокие уровни мРНК обоих цитокинов в популяциях Т-клеток и не-Т-клеток. Рентгенологическая степень заболевания также коррелировала с соотношением ИЛ-4/ИФН-γ и уровнем растворимого CD30 (p < 0.005). После противотуберкулезной химиотерапии уровни мРНК ИЛ-4 оставались неизменными, тогда как уровни ИЛ-4δ2 повышались параллельно с ИФН-γ (p < 0,05). Было обнаружено, что ультразвуковые препараты M. tuberculosis повышают экспрессию IL-4 по сравнению с IL-4δ2 в культурах мононуклеарных клеток пациентов (p <0,05). Таким образом, иммунологический ответ, вызываемый антигенами M.tuberculosis и включающий как IL-4, так и IL-4δ2, вероятно, играет важную роль в патогенезе туберкулеза. Таким образом, соотношение ИЛ-4/ИЛ-4δ2, переменная величина, которая может изменяться при лечении, является возможным маркером активности заболевания.

    Рук и его коллеги также рассмотрели актуальность этих результатов в отношении разработки противотуберкулезной вакцины (13). Они предположили, что географические различия в эффективности БЦЖ могут быть связаны с наличием перекрестно-реактивного фонового Th3-подобного ответа (вероятно, связанного с воздействием на мать и ребенка гельминтов и микобактерий из окружающей среды), который останавливает распространение M. tuberculosis . в латентное состояние защитной реакцией Th2. Таким образом, успешная вакцина, вместо того, чтобы концентрироваться исключительно на ответе Th2, может также нуждаться в подавлении ранее существовавшего подрывного Th3-подобного компонента.

    Другие средства решения проблемы баланса Th2 и Th3 также изучались исследователями по всему миру. Например, Silva и его коллеги недавно продемонстрировали, что иммунотерапия плазмидной ДНК, кодирующей белок теплового шока Mycobacterium leprae массой 65 кДа, в сочетании с противотуберкулезной химиотерапией может обеспечить более быструю и эффективную форму лечения мышиного туберкулеза (14). Эта дополнительная иммуномодуляция может иметь потенциальную роль в сокращении продолжительности химиотерапии.

    ЭПИДЕМИОЛОГИЯ ТУБЕРКУЛЕЗА

    Раздел:

    ChooseTop of pageПАТОГЕНЕЗ И ИММУНИТЕТ…ЭПИДЕМИОЛОГИЯ ТУБЕРКУЛЕЗА… <<ДИАГНОСТИКА ТУБЕРКУЛЕЗА... ЛЕЧЕНИЕ ТУБЕРКУЛЕЗА снижение заболеваемости, распространенности и смертности от туберкулеза может быть достигнуто к 2015 г. в большинстве регионов мира, но наиболее серьезные проблемы возникнут в Африке и Восточной Европе (15).

    В 2005 г. был опубликован ряд важных статей, посвященных проблеме туберкулеза, в основном касающейся его эпидемиологии, в Африке. Три из них были опубликованы в AJRCCM (16–18). Одна статья была посвящена риску повторного заражения (16). Во второй статье изучался риск заболевания туберкулезом среди ВИЧ-инфицированных, получающих высокоактивную антиретровирусную терапию в странах Африки к югу от Сахары, где распространены обе инфекции (17). В третьей статье рассматривалась смешанная инфекция более чем одним штаммом M.tuberculosis у одного хозяина в том же регионе (18). Каждое исследование имеет потенциально важные последствия для борьбы с туберкулезом в Африке. Полученные данные могут быть экстраполированы на другие районы с высокой распространенностью туберкулеза и обильным распространением ВИЧ-инфекции.

    Verver и соавт. продемонстрировали, что скорректированный по возрасту уровень заболеваемости туберкулезом, относимым на счет повторного заражения после успешного лечения, может быть в четыре раза выше, чем заболеваемость новым туберкулезом в районе с высокой распространенностью заболевания, например в Южной Африке (16).Это наблюдение означает, что лица, переболевшие туберкулезом однажды, подвергаются повышенному риску повторного заболевания при повторном заражении. Эта явно новая концепция заслуживает внимания, поскольку она кажется противоречащей тому, что можно было бы предположить. Однако при интерпретации результатов этого важного эпидемиологического исследования следует иметь в виду несколько предостережений. Среди них отсутствие данных о социально-экономическом состоянии и ВИЧ-статусе исследуемых пациентов, низкий процент доступных отпечатков ДНК из культур мокроты, а также значительная доля единичных положительных культур из образцов мокроты (19, 20).Тем не менее вывод, сделанный в результате этого исследования, заслуживает дальнейшего изучения, особенно в отношении выявления случаев заболевания и профилактического лечения групп риска в рамках программ борьбы с туберкулезом (16). Кроме того, результаты могут также подчеркнуть необходимость точного разграничения между заболеванием из-за рецидива и реинфекцией во время наблюдения за пациентами, включенными в испытания противотуберкулезной химиотерапии в районах с высокой распространенностью заболевания.

    В странах Африки к югу от Сахары туберкулез остается основной причиной смертности, связанной с ВИЧ.Заболеваемость туберкулезом у взрослых, получающих высокоактивную антиретровирусную терапию (ВААРТ), ниже, чем у нелеченных ВИЧ-инфицированных взрослых, но все же выше, чем у ВИЧ-отрицательных взрослых (21). Seyler и соавт. провели анализ факторов риска активного туберкулеза среди ВИЧ-инфицированных, получающих ВААРТ в этом регионе (17). Они изучили 7-летнюю проспективную когорту ВИЧ-инфицированных взрослых со стандартными процедурами документирования заболеваемости. В анализ была включена заболеваемость активным туберкулезом у пациентов, начавших ВААРТ, а также связь между исходными характеристиками пациентов и возникновением заболевания.В общей сложности ВААРТ начали 129 взрослых (со средним исходным числом лимфоцитов CD4 125/мкл 3 ), которые затем наблюдались в течение 270 человеко-лет. На момент начала ВААРТ у 31 пациента в анамнезе был туберкулез, но ни у одного из них не было активного заболевания в настоящее время. Во время их последующей оценки заболеваемость активным туберкулезом составила 4,8/100 человеко-лет в целом, 3,0/100 человеко-лет у пациентов без туберкулеза в анамнезе и 11,3/100 человеко-лет у пациентов с туберкулезом в анамнезе (скорректированная коэффициент опасности, 4.6; р = 0,02). Таким образом, риск развития туберкулеза после начала ВААРТ оказался значительно выше у пациентов с туберкулезом в анамнезе, чем без него. Этот вывод, если он будет подтвержден другими исследователями, может побудить рассмотреть возможную ограниченную по времени вторичную химиопрофилактику у взрослых жителей Африки к югу от Сахары с историей туберкулеза в анамнезе во время начала ВААРТ.

    Традиционно заражение с последующим заболеванием обычно связывают с одним штаммом M.туберкулез . Разработка фингерпринтинга ДНК позволила дифференцировать штаммов M.tuberculosis и сделала возможным документирование реинфекции по сравнению с рецидивом. Также наблюдались доказательства смешанной инфекции несколькими штаммами у одного хозяина (22, 23). van Rie и его коллеги недавно исследовали изменяющиеся модели лекарственной устойчивости M. tuberculosis , вызванные реинфекцией и смешанной инфекцией (18). Серийные культуры мокроты от 48 пациентов с диагнозом туберкулез с множественной лекарственной устойчивостью (МЛУ) оценивали с помощью фенотипического тестирования лекарственной чувствительности и методов обнаружения генотипических мутаций.Последний анализ был выполнен с помощью ДНК-фингерпринтинга IS6110 и нового штамм-специфического метода ПЦР-амплификации. Анализ ДНК серийных культур мокроты от этих исследуемых пациентов показал, что 10 случаев были связаны с реинфекцией, а один случай — со смешанной инфекцией. Напротив, штамм-специфическая ПЦР-амплификация в девяти случаях продемонстрировала смешанную инфекцию в пяти случаях, реинфекцию в трех случаях и лабораторное заражение в оставшемся случае. Корреляция с клиническими данными (особенно со схемами и сроками лечения) позволяет предположить, что противотуберкулезная терапия первого ряда может быть направлена ​​на резистентную субпопуляцию, в то время как плохое соблюдение или использование препаратов второго ряда (резервного) может привести к повторному появлению чувствительных к лекарственным средствам больных. субпопуляции.Таким образом, van Rie и его коллеги показали, что смешанная инфекция может быть важным механизмом, ответственным за наблюдения, связанные с повторным заражением с помощью ДНК-дактилоскопии, и что медикаментозное лечение и различная приверженность могут привести к избирательному появлению доминирующих субпопуляций микобактерий. Неспособность точно определить характер резистентности в случаях смешанной инфекции может привести к непреднамеренной задержке в диагностике лекарственно-устойчивого туберкулеза, что может иметь нежелательные последствия для ведения пациентов и контроля передачи болезни.

    Глинн и его коллеги недавно опубликовали статью, в которой резюмируется важность недавнего заражения M. tuberculosis в районе с высокой распространенностью ВИЧ, а именно в северной части Малави в Африке (24). Доля штаммов, которые оказались сгруппированными, была одной из самых высоких в мире (максимум достигал примерно двух третей). Связь с ВИЧ-инфекцией у пожилых людей (скорректированное ОШ, 5.1) может свидетельствовать о том, что ВИЧ-инфекция оказывает большее влияние на заболевание, вызванное недавней передачей, чем на заболевание, вызванное реактивацией.

    Воздействие ВИЧ-инфекции на туберкулез подтверждается недавним ретроспективным когортным исследованием золотодобытчиков в Южной Африке. Зонненберг и его коллеги проанализировали 740 человек (25). Заболеваемость туберкулезом увеличивалась с течением времени после сероконверсии, календарным периодом и возрастом. Он составил 2,90 случая на 100 человеко-лет у ВИЧ-положительных шахтеров и 0,80 случая на 100 человеко-лет у ВИЧ-отрицательных шахтеров (скорректированный коэффициент 2,9). Заболеваемость туберкулезом удвоилась в течение первого года ВИЧ-инфекции (скорректированный коэффициент 2.1). Эти исследователи пришли к выводу, что повышение риска заболевания туберкулезом вскоре после инфицирования ВИЧ было неожиданным, а современные прогностические модели заболеваемости туберкулезом могли недооценивать влияние ВИЧ-инфекции в районах, эндемичных по туберкулезу.

    Хотя профилактическая терапия туберкулеза могла снизить заболеваемость среди ВИЧ-инфицированных в клинических испытаниях, данные о ее эффективности в обычных условиях отсутствовали. Грант и его коллеги недавно опубликовали свое исследование профилактической терапии изониазидом у 1655 ВИЧ-инфицированных мужчин-сотрудников южноафриканской золотодобывающей компании, набранных в период с 1999 по 2001 год (до появления антиретровирусной терапии) (26).Они обнаружили, что профилактическая терапия изониазидом может снизить заболеваемость туберкулезом на 38% в целом и на 46% среди лиц, ранее не болевших туберкулезом. Хотя данные обнадеживают, все еще требуется дополнительная работа для изучения новых стратегий такой терапии.

    Помимо коинфекции ВИЧ, den Boon и его коллеги недавно сообщили о связи между курением и туберкулезной инфекцией посредством опроса населения в Южной Африке (27). Они обнаружили значительно более высокий уровень положительных результатов туберкулиновой кожной пробы (ТКП) среди когда-либо куривших, чем никогда не куривших (нескорректированное ОШ, 1.99). Также наблюдалась зависимость доза-реакция, при этом самый высокий риск был обнаружен среди тех, кто выкуривал более 15 пачек в год (скорректированное ОШ 1,90).

    ДИАГНОСТИКА ТУБЕРКУЛЕЗНОЙ ИНФЕКЦИИ

    Раздел:

    ChooseTop of pageПАТОГЕНЕЗ И ИММУНИТЕТ…ЭПИДЕМИОЛОГИЯ ТУБЕРКУЛЕЗА…ДИАГНОСТИКА ТУБЕРКУЛЕЗА… <<ЛЕЧЕНИЕ ТУБЕРКУЛЕЗА Тесты на высвобождение IFN-γ в диагностике туберкулезной инфекции.В отсутствие золотого стандарта для туберкулезной инфекции следует проявлять осмотрительность при принятии каких-либо твердых выводов относительно выполнения тестов. Тем не менее, эти исследования по-прежнему способствуют лучшему пониманию сложного вопроса и могут проложить путь к внедрению этих тестов в рутинную клиническую практику в ближайшем будущем.

    Недавние исследования показали, что новые анализы крови на IFN-γ могут повысить специфичность и чувствительность диагностики латентной туберкулезной инфекции по сравнению с традиционной ТКП (28).QuantiFeron-TB Gold (QFT-Gold; Cellestis Ltd., Виктория, Австралия) продемонстрировал многообещающие результаты в отдельных группах испытуемых (28, 29). Однако было неясно, будет ли этот тест хорошо работать в неотобранной популяции пациентов, независимо оцененных на предмет возможной туберкулезной инфекции. Таким образом, Ferrara и соавт. попытались использовать тест QFT-Gold для диагностики туберкулезной инфекции в обычных больничных условиях (30). Их основная цель состояла в том, чтобы оценить тест у невыбранных пациентов на предмет его соответствия ТКП; противоречивые результаты интерпретировались в свете окончательного клинического диагноза и потенциальных искажающих факторов.Из 318 протестированных пациентов 68 (21,4%) дали неопределенные результаты теста, со значительным преобладанием среди пациентов с отрицательной ТКП (28,9%) по сравнению с пациентами с положительной ТКП (6,6%). Эти неопределенные результаты QFT-Gold также чаще встречались среди пациентов, получавших иммуносупрессивную терапию, чем среди тех, кто ее не получал (ОШ 3,35; p < 0,0001). После исключения неопределенных результатов соответствие между QFT-Gold и TST было значительно ниже у вакцинированных БЦЖ, чем у невакцинированных лиц (41.5 против 80,3%, р < 0,0001). Кроме того, среди 11 пациентов с активным туберкулезом (пять с положительным результатом посева) QFT-Gold дал больше положительных результатов, чем TST (66,7 против 33,3%, p = 0,165). Феррара и его коллеги пришли к выводу, что тест QFT-Gold подходит для рутинного использования в больницах для диагностики туберкулезной инфекции (30). Однако, как и в случае с ТКП, иммуносупрессия может негативно повлиять на эффективность теста, приводя к значительной частоте неопределенных результатов в этой наиболее уязвимой популяции пациентов.Неопределенные результаты этого анализа IFN-γ у субъектов с подавленным иммунитетом могут насторожить клинициста о возможной анергии и помочь избежать путаницы между анергией и истинно отрицательным результатом теста. В этом контексте клиницист может незамедлительно продолжить дальнейшие исследования для диагностики или исключения туберкулеза у этих пациентов из группы риска (31).

    Равн и его коллеги недавно опубликовали отчет о потенциальной ценности теста Quantiferon-TB RD1 (QFT-RD1) с использованием M.tuberculosis – специфические антигены для диагностики активного туберкулеза (32). Чувствительность QFT-RD1 составила 85 %, что выше, чем у микроскопии (42 %, p = 0,001) и посева (59 %, p = 0,009). Несмотря на хорошую чувствительность среди пациентов с активным туберкулезом, в том числе с отрицательными результатами микроскопии и посева, QFT-RD1 остается в основном тестом на туберкулезную инфекцию, а не на само заболевание. Положительный результат трудно интерпретировать в районах с высокой фоновой распространенностью латентной туберкулезной инфекции.

    Pai и его коллеги недавно опубликовали свой опыт оценки латентной туберкулезной инфекции среди медицинских работников в сельских районах Индии с помощью анализа цельной крови на IFN-γ и ТКП (33). Среди 726 медицинских работников (68% с непосредственным контактом с больными туберкулезом и 71% с рубцами БЦЖ) 50% были положительными либо по ТКП, либо по тесту на ИФН-γ, а 31% — по обоим тестам. Согласие между тестами было высоким (81%, κ = 0,61). Было обнаружено, что увеличение возраста и количество лет работы в сфере здравоохранения являются значительными факторами риска для положительных результатов обоих тестов.Вакцинация БЦЖ, о чем свидетельствует наличие рубца БЦЖ, мало повлияла на результаты. Таким образом, среди медицинских работников этой развивающейся страны с высокой распространенностью заболевания выявлен значительный уровень латентной туберкулезной инфекции. Хотя TST и IFN-γ дали сопоставимые положительные результаты в этой популяции, все еще сохраняются существенные различия в их эффективности и рабочих характеристиках. Решение о выборе того или иного теста также будет зависеть от популяции, цели тестирования и наличия ресурсов.

    Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA) утвердило тест QFT-Gold и проводит оценку иммуноферментного анализа (ELISPOT), который уже был одобрен в Европе. Последний тест выявляет отдельные Т-клетки, продуцирующие цитокины. Протокол ELISPOT в настоящее время упрощен с использованием автоматических вакутейнеров для разделения клеток и продается как тест T SPOT-TB (Oxford Immunotec, Оксфорд, Великобритания).

    Shams и соавт. провели исследование по сравнению ELISPOT и TST для выявления латентной туберкулезной инфекции у лиц, контактировавших с больными туберкулезом (34).Из-за отсутствия золотого стандарта для латентной туберкулезной инфекции чувствительность и специфичность ELISPOT и TST нельзя было измерить напрямую. Таким образом, исследователи оценили вероятность наличия латентной туберкулезной инфекции, используя контактную оценку, которая количественно определяла воздействие и заразность основного случая, и проанализировали взаимосвязь контактной оценки с результатами ELISPOT и TST. Вероятность положительного результата ELISPOT (p = 0,0005) и TST (p = 0,01) значительно увеличивалась с увеличением количества контактов.Оценка контактов была более тесно связана с результатами ELISPOT, чем с результатами TST, хотя разница не была статистически значимой, возможно, из-за ограниченного размера выборки. (В более раннем отчете в Соединенном Королевстве [35], вероятно, эта цель была достигнута лучше из-за большего размера выборки, но, возможно, также была недооценена чувствительность ТКП.) Лица, родившиеся за границей, вакцинированные БЦЖ, имели значительно большую вероятность положительного результата. TST, чем положительный ELISPOT (p <0,0001). Таким образом, ELISPOT оказывается не менее чувствительным, чем ТКП, для диагностики латентной туберкулезной инфекции у лиц, контактировавших с больными туберкулезом, и, вероятно, более специфичным, чем ТКП у лиц, вакцинированных БЦЖ.Эта повышенная специфичность подтверждает результаты исследования, проведенного в эндемичных тропических условиях (36). Такое преимущество имеет потенциальную ценность для снижения числа ложноположительных диагнозов, тем самым избавляя от неоправданного лечения с последствиями затрат и токсичности.

    Недавно опубликованное исследование, проведенное в Корее с промежуточным бременем туберкулеза, также показало, что анализ цельной крови на IFN-γ является лучшим индикатором риска инфицирования M. tuberculosis , чем ТКП в популяции, вакцинированной БЦЖ (37).В этом исследовании было рассмотрено несоответствие между двумя тестами для диагностики латентной туберкулезной инфекции среди четырех групп участников с разным риском заражения, а именно: недавние случайные контакты, недавние близкие контакты, бактериологически или патологоанатомически подтвержденный туберкулез и лица без идентифицируемого риска заражения. туберкулёзная инфекция.

    Исследование детей с клиническим диагнозом туберкулеза показало выявляемый ответ на М.tuberculosis –специфические антигены, ESAT-6 или белок культурального фильтрата 10 (CFP-10) у 70% испытуемых и чаще у пациентов с подтвержденным посевом заболеванием (38).Таким образом, тест ELISPOT, специфичный к M. tuberculosis , вероятно, является многообещающим инструментом для диагностики туберкулеза у детей, так как его интерпретация в меньшей степени зависит от более низкой фоновой распространенности латентной туберкулезной инфекции в этой возрастной группе. Другое исследование также показало, что использование комбинированного пептидного точечного подсчета и слитого белка ESAT-6/CFP-10 может повысить чувствительность тестирования для оптимальной диагностики латентной туберкулезной инфекции (39).

    В недавнем исследовании, проведенном в Гамбии, также изучались количественные кожные тесты с очищенными белковыми производными (PPD) и результаты PPD ELISPOT в здоровых домашних контактах больных туберкулезом с положительным результатом мазка/культуры (40).Как размер реакции кожного теста PPD, так и количество PPD ELISPOT с большей вероятностью были больше у субъектов, демонстрирующих положительный ответ ELISPOT на гибридный пептид, содержащий ESAT-6/CFP-10, чем у тех, у кого этот ответ не проявлялся (p <0,0001). Однако при сравнении результатов количественного кожного теста PPD и результатов PPD ELISPOT у субъектов с положительным результатом ESAT-6/CFP-10 только подсчет ELISPOT был чувствителен к градиенту воздействия. Количество положительных пятен значительно увеличилось с экспозицией (p = 0,009), что указывает на его потенциальную ценность для отражения инфекционной нагрузки при недавнем контакте.

    В одном недавнем отчете также представлены предварительные данные о том, что тест ELISPOT может хорошо диагностировать туберкулезную инфекцию среди ВИЧ-позитивных субъектов, в том числе с низким числом Т-лимфоцитов CD4 (41), что подтверждает результаты более раннего исследования ВИЧ-инфекции. инфицированных детей (42). ЛЕЧЕНИЕ ТУБЕРКУЛЕЗА в дозе 600 мг один раз в неделю приводило к более высокой частоте рецидивов туберкулеза, чем введение рифампина три раза в неделю или два раза в неделю (RMP) (43, 44).Кроме того, у ВИЧ-позитивных субъектов монорезистентность к рифамицину может возникать, когда у этих пациентов возникает рецидив после лечения РПЭ (45). Таким образом, Сиргель и его коллеги впоследствии провели исследование, чтобы сравнить раннюю бактерицидную активность (РБА) RPE и его фармакокинетику с фармакокинетикой RMP, пытаясь определить основной механизм плохого клинического ответа и повторного роста микобактерий между дозами рифамицина, который может привести к развитию монорезистентности к рифамицину при рецидиве (46).Основная цель исследования состояла в том, чтобы определить размер дозы RPE, которая могла бы обеспечить адекватное воздействие препарата для предотвращения повторного роста микобактерий. Исследования EBA проводились в течение первых 5 дней лечения у 123 пациентов с недавно диагностированным, ранее нелеченным туберкулезом легких с сильным положительным мазком в двух городах Южной Африки. Пациенты были случайным образом распределены по группам лечения для получения одного из следующих препаратов: ( 1 ) РПЭ 300 мг однократно, ( 2 ) РПЭ 600 мг однократно, ( 3 ) РПЭ 900 мг однократно. разовая доза, ( 4 ) RPE 1200 мг в виде разовой дозы, ( 5 ) RMP 150 мг в виде пяти ежедневных доз, ( 6 ) RMP 300 мг в виде пяти ежедневных доз или ( 7 ) RMP 600 мг на пять суточных доз.EBA рассчитывали как падение log 10 КОЕ/мл мокроты/сутки. Также было проведено фармакокинетическое исследование на 58 пациентах (в одном городе) путем измерения времени достижения максимальной концентрации в сыворотке, максимальной концентрации в сыворотке и площади под кривой зависимости концентрации от времени (AUC) для каждого размера дозы рифамицинов и их дезацетиловых метаболитов. Было обнаружено, что EBA для обоих рифамицинов были довольно схожими: линейная зависимость от логарифмической дозы при более низких дозах и криволинейная реакция при более высоких дозах с вероятным плато при 1136 мг для RPE.Отношения AUC к минимальной ингибирующей концентрации были одинаковыми для обоих рифамицинов при допущении, что только фракция свободных или несвязанных с белками препаратов (2% RPE и 14% RMP) проявляла фармакологическую активность в очагах поражения. Принимая во внимание размер импульса препарата и продолжительность постантибиотической задержки, доза 1200 мг RPE оказалась необходимой для улучшения ответа и предотвращения повторного роста между дозами этого циклопентилзамещенного рифамицина длительного действия и, следовательно, развития монорезистентности к рифамицину независимо от того, отсутствует сопутствующий препарат.Эти результаты могут иметь потенциально важное терапевтическое значение.

    Хотя гипотеза Sirgel et al. интересна и интригует, было бы трудно предположить, что показатели EBA могут адекватно определять дозировку рифамицина, оказывающего преимущественное воздействие на спящие бациллы или персистеры (47). Таким образом, представляется, что валидированные суррогатные маркеры срочно необходимы для оценки стерилизующего потенциала лекарств, используемых в настоящее время или разрабатываемых.

    Взаимодействие RMP с некоторыми высокоактивными антиретровирусными препаратами, особенно с ингибиторами протеазы ВИЧ, хорошо задокументировано.Альтернативный член класса рифамицинов, рифабутин, обладает гораздо меньшим эффектом из-за его более низкой фермент-индуцирующей активности в отношении семейства цитохромов Р450. Таким образом, терапия на основе рифабутина представляется лучшим выбором для лечения ВИЧ-туберкулеза. Бурман и его коллеги, а также Консорциум по исследованию туберкулеза проспективно оценивали пациентов с положительным посевом туберкулеза, получавших в условиях непосредственного наблюдения рифабутин, изониазид, пиразинамид и этамбутол в течение 2 мес (вводимых ежедневно, три раза в неделю или два раза в неделю) с последующим 4 мес. рифабутина два раза в неделю плюс изониазид (48).У большинства пациентов была запущенная стадия ВИЧ-инфекции. У 9 (5,3%) пациентов был неблагоприятный исход в виде неэффективности лечения или рецидива. У восьми из девяти (89%) пациентов было выявлено изолятов M.tuberculosis с приобретенной устойчивостью к рифамицину. Это событие было связано с низким количеством лимфоцитов CD4 (< 100/мкл 3 ). Таким образом, представляется, что прерывистая терапия на основе рифабутина для ВИЧ-обусловленного туберкулеза, хотя и хорошо переносится, может быть связана с высоким риском неудачи или рецидива при наличии выраженной иммуносупрессии.

    Исследование, проведенное в Нью-Йорке, дало результаты, подтверждающие выводы Бермана и его коллег. Было обнаружено, что ВИЧ-инфицированные пациенты, получавшие только схему на основе РМП, имели более высокий риск рецидива и приобретенной резистентности к РМП, если прерывистое введение РМП было начато во время интенсивной фазы лечения (отношение рисков: 6,7 для рецидива, 6,4 для приобретенной РМП). резистентность по сравнению с теми, кто не принимал прерывисто) (49). Эта ассоциация сохранилась, когда анализ был ограничен пациентами с числом клеток CD4 менее 100 cu/mm.Таким образом, представляется, что риск приобретенной устойчивости к рифамицину у ВИЧ-инфицированных больных туберкулезом зависит не столько от используемого рифамицина, сколько от режима дозирования рифамицина на интенсивной фазе лечения.

    Weiner et al. недавно показали, что у пациентов с ВИЧ и туберкулезом после поправки на количество Т-лимфоцитов CD4 + среднее воздействие рифабутина было значительно ниже у пациентов с неудачей или рецидивом, связанным с приобретенными устойчивыми к рифамицину микобактериями ( Сбой или рецидив АРР), чем без (50).Среднее воздействие изониазида не было значимо связано с неэффективностью или рецидивом АРР. Однако в модели многомерной логистической регрессии, скорректированной на воздействие рифабутина, более низкая экспозиция изониазида также была связана с неудачей или рецидивом АРР. Таким образом, Weiner и его коллеги пришли к выводу, что более низкие концентрации рифабутина и, возможно, изониазида в плазме были связаны с неэффективностью или рецидивом АРР у пациентов с туберкулезом и ВИЧ-инфекцией, получавших противотуберкулезную терапию два раза в неделю.

    Этамбутол является ключевым агентом в многокомпонентных схемах, используемых для лечения Mycobacterium avium комплексного заболевания легких. Офтальмическая токсичность потенциально является наиболее серьезной побочной реакцией, связанной с введением этамбутола, особенно у пожилых людей. В ретроспективном анализе, проведенном Griffith и соавт. (51) пациентов, включенных в шесть проспективных протоколов лечения комплексных заболеваний легких M. avium , которые включали этамбутол, у 50 пациентов (22%) было известно ранее существовавшее заболевание глаз.На фоне приема этамбутола 42% пациентов обратились к офтальмологу, а 10% прекратили прием этамбутола, по крайней мере временно. Среди пациентов, включенных в это исследование, у 8 из 139 (6%) при ежедневной терапии была диагностирована глазная токсичность, связанная с этамбутолом, тогда как у 0 из 90 (0%) при прерывистой терапии были какие-либо проблемы (p = 0,05). У всех пациентов с такой глазной токсичностью симптомы развились между визитами в поликлинику; ни у кого не было диагностировано рутинное тестирование остроты зрения и цветового зрения. Состояние глаз у всех пациентов вернулось к исходному после прекращения приема этамбутола.Существуют потенциальные ограничения этого исследования в отношении оценки глазной токсичности этамбутола (51). Во-первых, визуальный осмотр не проводился рутинно, а во-вторых, как правило, не существует единого диагностического теста, который можно было бы провести отдельно для подтверждения или исключения токсичности этамбутола.

    В другом проспективном исследовании Goyal et al. пациентов осматривали ежемесячно (52). Изучаемые зрительные параметры включали максимально скорректированную остроту зрения, папиллярные реакции, изменения диска зрительного нерва, цветовое зрение, контрастную чувствительность, время цикла зрачка, картирование поля зрения и вызванный зрительный потенциал.Индуцированная этамбутолом токсичность также наблюдалась у 10% пациентов. Максимальное восстановление зрения произошло в первые 6-8 недель после прекращения приема этамбутола. Полное восстановление зрения произошло только у одного пациента, у двух других оно было частичным. В более раннем анализе, проведенном в Великобритании, 8 из 10 пациентов с глазной токсичностью были обнаружены в результате рутинных осмотров глаз при последующих посещениях, и только у двух из этих пациентов были симптомы (53). Таким образом, представляется целесообразным контролировать остроту зрения и цветовое различение во время курса терапии этамбутолом.Прерывистая терапия этамбутолом представляется более безопасной, чем ежедневная терапия с точки зрения глазной токсичности, и это заслуживает дальнейшего изучения (51).

    Ряд важных исследований на животных был сосредоточен на изучении новых схем, включающих RPE и/или моксифлоксицин. RPE, циклопентил рифамицин длительного действия, в настоящее время используется вместе с изониазидом при продолжении лечения туберкулеза легких один раз в неделю (43, 44). Однако у ВИЧ-позитивных пациентов и пациентов с кавернозной болезнью выше частота неэффективности лечения или рецидивов (54).Первая группа пациентов также особенно подвержена риску развития приобретенной монорезистентности к рифамицину (45). Кроме того, было показано, что терапия изониазидом и изониазидом один раз в неделю менее активна, чем терапия три или два раза в неделю RMP и изониазидом (43, 44). Увеличение однонедельной дозы РПЭ с 10 до 15 мг/кг позволяет значительно улучшить фармакокинетические параметры препарата. Было показано, что моксифлоксацин, 8-метоксифторхинолон с длительным периодом полувыведения, мощной бактерицидной и хорошей стерилизующей активностью, сокращает время до конверсии посева при туберкулезе мышей (55), а также обеспечивает стабильное излечение (без рецидивов) у мышей. та же животная модель (56).

    На модели туберкулеза у мышей Rosenthal и соавт. недавно показали, что стерилизующая активность моксифлоксацина один раз в неделю плюс RPE (15 мг/кг) была значительно выше, чем стерилизующая активность денверского режима изониазида плюс RMP (57). ). Не было продемонстрировано существенной разницы в стерилизующем эффекте между применением изониазида один раз в неделю плюс RPE (15 мг/кг) и режимом Денвера. Эти данные потенциально могут быть полезны при разработке клинических испытаний схем, содержащих моксифлоксацин и РПЭ, для возможного сокращения и улучшения существующих схем противотуберкулезного лечения.Эти предварительные данные свидетельствуют о том, что эффективность продолжающего лечения изониазидом плюс РПЭ один раз в неделю может быть повышена путем замены изониазида моксифлоксацином и увеличения дозы РПЭ до 15 мг/кг. Отрадно отметить, что относительно недавнее исследование RPE показало, что серьезные побочные эффекты были редки даже среди пациентов, которые подвергались более высокому воздействию лекарственного средства (AUCo-бесконечность) или пиковым концентрациям лекарственного средства (58).

    В настоящее время 9-месячная ежедневная монотерапия изониазидом рекомендуется в качестве терапии первой линии при латентной туберкулезной инфекции (59).В качестве альтернативы был предложен 4-месячный курс ежедневной RMP, но его эффективность в основном оставалась непроверенной (60). Двухмесячный курс RMP плюс пиразинамид больше не рекомендуется для использования из-за опасений по поводу чрезмерной гепатотоксичности, несмотря на его эффективность (61).

    Приоритеты для разработки лучшего лечения латентной туберкулезной инфекции будут включать поиск и оценку схем (1), которые можно применять в течение более короткого периода времени и/или с более широкими интервалами, и (2) которые эффективны против MDR M.туберкулез . Что касается первой цели, RPE, рифамицин длительного действия, имеет значительную привлекательность. Текущая рекомендация для эмпирической терапии латентной туберкулезной инфекции после контакта с МЛУ-ТБ представляет собой комбинированную терапию пиразинамидом с этамбутолом или фторхинолоном в течение 6–12 месяцев, но соответствующие клинические данные в поддержку этого лечения отсутствуют.

    Нюрмбергер и его коллеги оценили несколько новых схем лечения латентной туберкулезной инфекции с использованием ранее проверенной мышиной модели, включающей мышей, иммунизированных M.bovis БЦЖ для усиления иммунитета хозяина перед заражением M. tuberculosis h47Rv (62). Используемые схемы лечения включали 3-месячные схемы, содержащие RPE один раз в неделю, и 6-месячные схемы, содержащие моксифлоксацин, по сравнению с контрольными схемами монотерапии изониазидом. Было обнаружено, что трехмесячные режимы RPE один раз в неделю в сочетании с изониазидом или моксифлоксацином столь же активны, как и ежедневный изониазид в течение 6–9 мес. Шестимесячные ежедневные комбинации моксифлоксацина с пиразинамидом, этионамидом или этамбутолом были более активны, чем пиразинамид плюс этамбутол, режим, рекомендованный для терапии возможной латентной туберкулезной инфекции после контакта с МЛУ-ТБ.Особенно активна комбинация моксифлоксацина с экспериментальным нитроимидазопираном ПА-824. Наконец, ДНК-вакцина Hsp65 сама по себе не оказывала противотуберкулезного действия в мышиной модели, но было обнаружено, что она усиливает микобактерицидную активность моксифлоксацина. Эти результаты, взятые вместе, позволяют предположить, что RPE, моксифлоксацин и, возможно, терапевтическая ДНК-вакцинация могут улучшить существующую терапию латентной туберкулезной инфекции.

    1. Raynaud C, Guilhot C, Rauzier J, Bordat Y, Pelicic V, Manganelli R, Smith I, Gicquel B, Jackson M.Фосфолипазы C вовлечены в вирулентность Mycobacterium tuberculosis . Mol Microbiol 2002;45:203–217.
    2. Tsolaki AG, Hirsh AE, DeRiemer K, Enciso JA, Wong MZ, Hannan M, Yves-Olivier L, de la Salmoniere G, Aman K, Kato-Maeda M, et al . Функциональная и эволюционная геномика Mycobacterium tuberculosis : выводы из геномных делеций в 100 штаммах. Proc Natl Acad Sci USA 2004;101:4865–4870.
    3. Talarico S, Durmaz R, Yang Z. Генетическое разнообразие, связанное с вставками и делециями Mycobacterium tuberculosis генов, кодирующих фосфолипазу C, среди 106 клинических изолятов из Турции. J Clin Microbiol 2005;43:533–538.
    4. Yang Z, Yang D, Kong Y, Zhang L, Marrs CF, Foxman B, Bates JH, Wilson F, Cave MD. Клиническая значимость мутаций гена Mycobacterium tuberculosis plcD . Am J Respir Crit Care Med 2005;171:1436–1442.
    5. Иззо А.А., Иззо Л.С., Касимос Дж., Майка С. Ингибитор матриксной металлопротеиназы способствует образованию гранулемы на ранней стадии легочной инфекции Mycobacterium tuberculosis . Туберкулез (Эдинб) 2004;84:387–396.
    6. Elkington PT, Nuttall RK, Boyle JJ, O’Kane CM, Horncastle DE, Edwards DR, Friedland JS. Mycobacterium tuberculosis , но не вакцина БЦЖ специфически активирует матриксную металлопротеиназу-1. Am J Respir Crit Care Med 2005;172:1596–1604.
    7. Elkington PT, Emerson JE, Lopez-Pascua LDC, O’Kane CM, Horncastle DE, Boyle JJ, Friedland JS. Mycobacterium tuberculosis повышает секрецию матриксной металлопротеиназы-1 из эпителиальных клеток дыхательных путей человека посредством переключателя p38 MAPK. J Immunol 2005;175:5333–5340.
    8. Карранса С., Хуарес Э., Торрес М., Эллнер Дж.Дж., Сада Э., Швандер С.К. Контроль роста Mycobacterium tuberculosis с помощью легочных макрофагов и клеток CD8 от контактов с пациентами. Am J Respir Crit Care Med 2006;173:238–245.
    9. Рой Э., Ставропулос Э., Бреннан Дж., Коуд С., Григорьева Э., Уокер Б., Дагг Б., Таскон Р.Э., Лоури Д.Б., Колстон М.Дж., и др. . Терапевтическая эффективность высоких доз внутривенного иммуноглобулина при инфекции Mycobacterium tuberculosis у мышей. Infect Immun 2005;73:6101–6109.
    10. Ирвин С.М., Иззо А.А., Доу С.В., Скейки Я.В., Рид С.Г., Олдерсон М.Р., Орм И.М. Отслеживание антигенспецифических Т-лимфоцитов CD8 в легких мышей, вакцинированных полипротеином Mtb72F. Infect Immun 2005;73:5809–5816.
    11. Ладья ГАВ, Эрнандес-Пандо Р., Дхеда К., Сих Г.Т. ИЛ-4 при туберкулезе: последствия для дизайна вакцины. Trends Immunol 2004; 25:483–488.
    12. Дхеда К., Чанг Дж.С., Брин Рэм, Ким Л.У., Хэддок Дж.А., Хаггетт Дж.Ф., Джонсон М.А., Рук Г.А.О., Зумла А. In vivo и in vitro исследований нового цитокина, интерлейкина-4δ2, при туберкулезе легких. Am J Respir Crit Care Med 2005;172:501–508.
    13. Rook GAW, Dheda K, Zumla A. Должны ли успешные вакцины быть иммунорегуляторными, а не просто стимулирующими Th2? Вакцина 2005; 23:2115–2120.
    14. Silva CL, Bonato VLD, Coelho-Castelo AAM, De Souza AO, Santos SA, Lima KM, Faccioli LH, Rodrigues JM.Иммунотерапия плазмидной ДНК, кодирующей микобактериальный hsp65, в сочетании с химиотерапией является более быстрой и эффективной формой лечения туберкулеза у мышей. Джин Тер 2005; 12: 281–287.
    15. Краситель C, Watt CJ, Bleed DM, Hosseini SM, Raviglione MC. Эволюция борьбы с туберкулезом и перспективы снижения заболеваемости, распространенности и смертности от туберкулеза во всем мире. JAMA 2005; 293:2767–2775.
    16. Вервер С., Уоррен Р.М., Бейерс Н., Ричардсон М., ван дер Спуй Г.Д., Боргдорф М.В., Энарсон Д.А., Бер М.А., ван Хелден П.Д.Частота повторного заражения туберкулезом после успешного лечения выше, чем частота нового туберкулеза. Am J Respir Crit Care Med 2005;171:1430–1435.
    17. Seyler C, Toure S, Messou E, Bonard D, Gabillard D, Anglaret X. Факторы риска активного туберкулеза после начала антиретровирусного лечения в Абиджане. Am J Respir Crit Care Med 2005;172:123–127.
    18. ван Ри А., Виктор Т.С., Ричардсон М., Джонсон Р., ван дер Спуй Г.Д., Мюррей Э.Дж., Бейерс Н., Гей ван Питтиус Н.К., Ван Хелден П.Д., Уоррен Р.М.Реинфекция и смешанная инфекция вызывают изменение Mycobacterium tuberculosis паттернов лекарственной устойчивости. Am J Respir Crit Care Med 2005;172:636–642.
    19. Ю В.В., Леунг К.К. Разве некоторые люди не чувствуют себя в большей безопасности после успешного лечения туберкулеза? Am J Respir Crit Care Med 2005;171:1324–1325.
    20. Sonnenberg P, Murray J, Glynn JR, Shearer S, Kambashi B, Godfrey-Faussett P. ВИЧ-1 и рецидив, рецидив и повторное заражение туберкулезом после лечения: когортное исследование среди горняков Южной Африки . Ланцет 2001; 358:1687–1693.
    21. Badri M, Wilson D, Wood R. Влияние высокоактивной антиретровирусной терапии на заболеваемость туберкулезом в Южной Африке: когортное исследование. Ланцет 2002; 359:2059–2064.
    22. Уоррен Р.М., Виктор Т.С., Штрейхер Э.М., Ричардсон М., Бейерс Н., Гей ван Питтиус Н.К., ван Хелден П.Д. У больных активным туберкулезом в одном и том же образце мокроты часто обнаруживаются разные штаммы. Am J Respir Crit Care Med 2004;169:610–614.
    23. Бер М.А. Туберкулез, вызванный множественными штаммами: проблема для пациента? Забота о борьбе с туберкулезом? Am J Respir Crit Care Med 2004;169:554–555.
    24. Glynn JR, Crampin AC, Yates MD, Traore H, Mwaungulu FD, Ngwira BM, Ndlovu R, Drobniewski F, Fine PEM. Важность недавнего заражения Mycobacterium tuberculosis в районе с высокой распространенностью ВИЧ: долгосрочное молекулярно-эпидемиологическое исследование в северной части Малави. J Infect Dis 2005;192:480–487.
    25. Sonnenberg P, Glynn JR, Fielding K, Murray J, Godfrey-Faussett P, Shearer S. Как скоро после инфицирования ВИЧ начинает увеличиваться риск заболевания туберкулезом? Ретроспективное когортное исследование южноафриканских золотодобытчиков. J Infect Dis 2005;191:150–158.
    26. Грант А.Д., Хараламбус С., Филдинг К.Л., Дэй Дж.Х., Корбетт Э.Л., Чейссон Р.Е., Де Кок К.М., Хейс Р.Дж., Черчиярд Г.Дж.Влияние плановой профилактической терапии изониазидом на заболеваемость туберкулезом среди ВИЧ-инфицированных мужчин в Южной Африке: новое рандомизированное добавочное исследование. JAMA 2005; 293:2790–2793.
    27. den Boon S, van Lill SW, Borgdoff MW, Verver S, Bateman ED, Lombard CJ, Enarson DA, Beyers N. Связь между курением и туберкулезной инфекцией: обследование населения в районе с высокой заболеваемостью туберкулезом . Грудная клетка 2005; 60: 555–557.
    28. Брок И., Велдинг К., Лиллебек Т., Фоллманн Ф., Андерсен П. Сравнение туберкулиновой кожной пробы и нового специфического анализа крови при контактах с туберкулезом. Am J Respir Crit Care Med 2004;170:65–69.
    29. Richeldi L, Ewer K, Losi M, Bergamini BM, Roversi P, Deeks J, Fabbri LM, Lalvani A. Т-клеточное отслеживание туберкулезной инфекции с множественной лекарственной устойчивостью после кратковременного воздействия. Am J Respir Crit Care Med 2004;170:288–295.
    30. Феррара Г., Лоси М., Меаччи М., Меккуни Б., Пиро Р., Роверси П., Бергамини Б.М., Д’Амико Р., Маркеджано П., Румпианези Ф., и др. Рутинное использование в больницах нового коммерческого анализа интерферона-γ цельной крови для диагностики туберкулезной инфекции. Am J Respir Crit Care Med 2005;172:631–635.
    31. Пай М., Левинсон Д.М. Тесты на интерферон-γ при туберкулезе: анергия – ахиллесова пята? Am J Respir Crit Care Med 2005;172:519–520.
    32. Ravn P, Munk ME, Andersen AB, Lundgren B, Lundgren JD, Nielsen LN, Kok-Jensen A, Andersen P, Weldingh K. Проспективная оценка анализа цельной крови с использованием Mycobacterium tuberculosis- специфических антигенов ESAT-6 и CFP-10 для диагностики активного туберкулеза. Clin Diagn Lab Immunol 2005; 12:491–496.
    33. Pai M, Gokhale K, Joshi R, Dogra S, Kalantri S, Mendiratta DK, Narang P, Daley CL, Granich RM, Mazurek GH, et al.Инфекция Mycobacterium tuberculosis у медицинских работников в сельских районах Индии: сравнение анализа интерферона-γ цельной крови с туберкулиновым кожным тестом. JAMA 2005; 293:2746–2755.
    34. Шамс Х., Вайс С.Е., Клукар П., Лалвани А., Мунан П.К., Погода Дж.М., Эвер К., Барнс П.Ф. Кожная иммуноферментная и туберкулиновая пробы для выявления латентной туберкулезной инфекции. Am J Respir Crit Care Med 2005;172:1161–1168.
    35. Эвер К., Дикс Дж., Альварез Л., Брайант Г., Уоллер С., Андерсен П., Монк П., Лалвани А. Сравнение Т-клеточного анализа с кожным туберкулиновым тестом для диагностики инфекции Mycobacterium tuberculosis в школьном туберкулезе вспышка. Ланцет 2003; 361:1168–1173.
    36. Hill PC, Brookes RH, Fox A, Fielding K, Jeffries DJ, Jackson-Sillah D, Lugos MD, Owiafe PK, Donkor SA, Hammond AS, et al. Крупномасштабная оценка иммуноферментного анализа и кожных тестов для диагностики инфекции Mycobacterium tuberculosis в зависимости от градиента экспозиции в Гамбии. Clin Infect Dis 2004; 38:966–973.
    37. Кан Ю.А., Ли Х.В., Юн Х.И. Белонг Чо, Сон Ку Хан, Ён-Су Шим, Джэ-Джун Йим. Несоответствие между туберкулиновой кожной пробой и анализом интерферона-γ цельной крови для диагностики латентной туберкулезной инфекции в стране со средним бременем туберкулеза. JAMA 2005; 293:2756–2761.
    38. Никол М.П., ​​Пиенаар Д., Вуд К., Элей Б., Уилкинсон Р.Дж., Хендерсон Х., Смит Л., Самодиен С., Битти Д.Реакции иммуноферментного анализа на ранний секреторный антиген-мишень 6, белок культурального фильтрата 10 и очищенное производное белка у детей с туберкулезом: значение для диагностики и мониторинга терапии. Clin Infect Dis 2005;40:1301–1308.
    39. Hill PC, Jackson-Sillah D, Fox A, Franken KLMC, Lugos MD, Jeffries DJ, Donkor SA, Hammond AS, Adegbola RA, Ottenhoff THM, et al. Гибридный белок ESAT-6/CFP-10 и пептиды для оптимальной диагностики инфекции Mycobacterium tuberculosis с помощью иммуноферментного анализа ex vivo в Гамбии. J Clin Microbiol 2005;43:2070–2074.
    40. Hill PC, Fox A, Jeffries DJ, Jackson-Sillah D, Lugos MD, Owiafe PK, Donkor SA, Hammond AS, Corrah T, Adegbola RA, et al. Количественный анализ Т-клеток отражает инфекционную нагрузку Mycobacterium tuberculosis в модели контакта с эндемичным случаем. Clin Infect Dis 2005;40:273–278.
    41. Дхеда К., Лалвани А., Миллер Р.Ф., Скотт Г., Бут Х., Джонсон М.А., Зумла А., Рук Г.А.Эффективность Т-клеточного диагностического теста на туберкулезную инфекцию у ВИЧ-инфицированных лиц не зависит от числа клеток CD4. СПИД 2005;19:2038–2041.
    42. Liebeschuetz S, Bamber S, Ewer K, Deeks J, Pathan AA, Lalvani A. Диагностика туберкулеза у южноафриканских детей с помощью Т-клеточного анализа: проспективное когортное исследование. Ланцет 2004; 364:2196–2203.
    43. Тэм К.М., Чан С.Л., Кам К.М., Гудолл Р.Л., Митчисон Д.А.Рифапентин и изониазид в фазе продолжения 6-месячного режима: окончательный отчет через 5 лет: прогностическое значение различных показателей. Int J Tuberc Lung Dis 2002; 6:3–10.
    44. Benator D, Bhattacharya M, Bozeman L, Burman W, Catanzaro A, Chaisson R, Gordin F, Horsburgh CR, Horton J, et al ; Консорциум по испытаниям туберкулеза. Рифапентин и изониазид один раз в неделю по сравнению с рифампицином и изониазидом два раза в неделю для лечения лекарственно-чувствительного туберкулеза легких у ВИЧ-отрицательных пациентов: рандомизированное клиническое исследование. Ланцет 2002; 360: 528–534.
    45. Вернон А., Бурман В., Бенатор Д., Хан А., Бозман Л.; Консорциум по испытаниям туберкулеза. Приобретенная монорезистентность к рифамицину у пациентов с ВИЧ-ассоциированным туберкулезом, получавших лечение рифапентином и изониазидом один раз в неделю. Ланцет 1999; 353:1843–1847.
    46. Сиргел Ф.А., Фури П.Б., Дональд П.Р., Падаятчи Н., Растомджи Р., Левин Дж., Роскиньо Г., Норман Дж., Макиллерон Х., Митчисон Д.А.; Совместная исследовательская группа EBA по рифапентину.Ранняя бактерицидная активность рифампина и рифапентина при туберкулезе легких. Am J Respir Crit Care Med 2005;172:128–135.
    47. Уоллис Р.С. Могут ли исследования ранней бактерицидной активности рифапентина рассказать нам, как предотвратить рецидив приобретенной устойчивости к рифамицину? Am J Respir Crit Care Med 2005; 172:4–5.
    48. Бурман В., Бенатор Д., Вернон А., Хан А., Джонс Б., Силва К., Лахарт К., Вайс С., Кинг Б., Мангура Б., Вайнер М., Эль-Садр В.Приобретенная устойчивость к рифамицину при лечении туберкулеза, связанного с ВИЧ, два раза в неделю. Am J Respir Crit Care Med 2006;173:350–356.
    49. Li J, Munsiff SS, Driver CR, Sackoff J. Рецидив и приобретенная устойчивость к рифампину у ВИЧ-инфицированных пациентов с туберкулезом, получавших лечение по схемам на основе рифампина или рифабутина в Нью-Йорке, 1997–2000 гг. Clin Infect Dis 2005; 41:83–91.
    50. Вайнер М., Бенатор Д., Бурман В., Пелокин К.А., Хан А., Вернон А., Джонс Б., Сильва-Триго К., Чжао З., Ходж Т.; Консорциум по испытаниям туберкулеза.Связь между приобретенной устойчивостью к рифамицину и фармакокинетикой рифабутина и изониазида у пациентов с ВИЧ и туберкулезом. Clin Infect Dis 2005;40:1481–1491.
    51. Griffith DE, Brown-Elliott BA, Shepherd S, McLarty J, Griffith L, Wallace RJ Jr. Окулярная токсичность этамбутола в схемах лечения сложного заболевания Mycobacterium avium . Am J Respir Crit Care Med 2005;172:250–253.
    52. Goyal JL, De Sarmi INP, Singh INP, Bhatia A. Оценка зрительных функций у пациентов, принимающих этамбутол при лечении туберкулеза: проспективное исследование. J Commun Dis 2003; 35: 230–243.
    53. Citron KM, Thomas GO. Окулярная токсичность этамбутола. Грудная клетка 1986; 41:737–739.
    54. Американское торакальное общество/Центры по контролю и профилактике заболеваний/Американское общество инфекционных заболеваний.Лечение туберкулеза. Am J Respir Crit Care Med 2003;167:603–662.
    55. Нюрмбергер Э.Л., Йошимацу Т., Тьяги С., О’Брайен Р.Дж., Вернон А.Н., Чейссон Р.Е., Бишай В.Р., Гроссет Д.Х. Режим, содержащий моксифлоксацин, значительно сокращает время до конверсии посева при туберкулезе мышей. Am J Respir Crit Care Med 2004;169:421–426.
    56. Нюрмбергер Э.Л., Йошимацу Т., Тьяги С., Уильямс К., Розенталь И., О’Брайен Р.Дж., Вернон А.А., Чейссон Р.Е., Бишай В.Р., Гроссет Д.Х.Схемы, содержащие моксифлоксацин, сокращенной продолжительности, обеспечивают стабильное излечение туберкулеза мышей. Am J Respir Crit Care Med 2004;170:1131–1134.
    57. Розенталь И.М., Уильямс К., Тьяги С., Вернон А.А., Пелокин К.А., Бишай В.Р., Гроссет Д.Х., Нюрмбергер Э.Л. Еженедельный прием моксифлоксацина и рифапентина более активен, чем схема Денвера, при туберкулезе мышей. Am J Respir Crit Care Med 2005;172:1457–1462.
    58. Weiner M, Bock N, Peloquin CA, Burman WJ, Khan A, Vernon A, Zhao Z, Weis S, Sterling TR, Hayden K, et al ; Консорциум по испытаниям туберкулеза.Фармакокинетика рифапентина в дозах 600, 900 и 1200 мг при лечении туберкулеза один раз в неделю. Am J Respir Crit Care Med 2004;169:1191–1197.
    59. Центры по контролю и профилактике заболеваний/Американское торакальное общество. Таргетное туберкулиновое тестирование и лечение латентной туберкулезной инфекции. MMWR Morb Mortal Wkly Rep 2000;49(RR-6):1–51.
    60. Рейхман Л.Б., Лардизабал А., Хейден Ч.Х. Рассмотрение роли рифампина в течение четырех месяцев в лечении латентной туберкулезной инфекции. Am J Respir Crit Care Med 2004;170:832–835.
    61. Центры по контролю и профилактике заболеваний, Американское торакальное общество. Обновление: данные о нежелательных явлениях и пересмотренные рекомендации Американского торакального общества/CDC против использования рифампина и пиразинамида для лечения латентной туберкулезной инфекции — США, 2003 г. MMWR Morb Mortal Wkly Rep 2003; 52:735–739.
    62. Нюрмбергер Э., Тьяги С., Уильямс К.Н., Розенталь И., Бишай В.Р., Гроссет Дж.Х.Рифапентин, моксифлоксацин или ДНК-вакцина улучшают лечение латентного туберкулеза на мышиной модели. Am J Respir Crit Care Med 2005;172:1452–1456.

    Полная последовательность генома Helicobacter pylori B128 7.13 и одностадийный метод получения немаркированных мутаций

    %PDF-1.6 % 1 0 объект >поток 2019-06-14T12:15:32+05:302019-07-18T20:39:20-07:002019-07-18T20:39:20-07:00Acrobat Distiller 10.1.7 (Windows)10.1111/hel.1258710.1111/ (ISSN) 1523-53783VoR10.1111/hel.12587application/pdf

  • Полная последовательность генома Helicobacter pylori B128 7.13 и одноэтапный метод получения немаркированных мутаций
  • uuid:02276e72-98f4-4b14-be39-2624ba8c4d1auuid:d9a53b3b-720d-4215-8e43-7965c647780fБиблиотека Adobe PDF 15.0; изменено с использованием iText 4.2.0 от 1T3XT конечный поток эндообъект 4 0 объект >поток HWMcr^ [email protected],C`؊8YK~|,*vj-|Cviyaۧ% |xw -Oyx/mu˽mĔWAbkҷ%~w−`Pd -D\U=gXWYm1zz1~IF\’J~_O:y%@c뗟ßn?\ _~ǿ_ׇo3o}gk`’`[XdUM7 #) JiEz]B]oKĽo1

    .

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован.